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緑茶成分エピガロカテキンガレートの抗ガン作用の分子基盤の解析

绿茶成分表没食子儿茶素没食子酸酯抗癌作用的分子基础分析

基本信息

批准号：
15780102
负责人：
佐伯晃一
金额：
$ 2.43万
依托单位：
University of Hyogo (2004)Himeji Institute of Technology (2003)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15780102/
关键词：
EGCG フィブロネクチン HRG 分子間相互作用

项目摘要

1)フィブロネクチンおよびHRGのリジルエンドペプチダーゼ消化ペプチドはEGCGに対して結合する。フィブロネクチンの結合部位はヘパリン結合ドメインIIであり、HRGの結合部位はシスタチンドメイン1および2である。これらの結合部位におけるアミノ酸配列の相同性を調べるためにマルチプルアライメントを行ったところ、非常に疎水性に富んだ配列が検出された。この配列はフィブロネクチンの14番目のIII型リピート内にあるインテグリン機能調節部位に相当する。2)1)で得られた配列を用いて、EGCGに対して結合することが知られているフィブリノーゲン、67LR、PDGFRbについてマルチプルアライメントを行ったところ、同様の配列が検出された。但し、67LRにおいてはEGCG結合配列として予測された部位は67LRの細胞内ドメインであった。3)67LRおよび、67LRの細胞内ドメインを削った発現プラスミドを構築し、293細胞に発現させ、細胞破砕液をEGCG固定化カラムにかけ、67LRに対するウエスタンブロットにより検出を行った。その結果、67LRはEGCGに結合し、67LRの細胞内ドメイン欠失体は結合が抑えられることが示された。現在、67LRの細胞外ドメインにおけるEGCG結合部位の予測を行い、67LRの細胞外ドメイン欠失体および、フィブロネクチンのインテグリン機能調節部位欠失体の作製を行っており、EGCGと相互作用するアミノ酸配列の絞り込みを行っている。

1) The combination of EGCG and EGCG in the selection process. The junction of HRG is located in the junction II of HRG and the junction 1 of HRG. The binding site of the protein is not identical to the acid sequence. The configuration of the 14-part III release is equivalent to the function of the release. 2)1) Get a list of all the items in the list, EGCG, PDGFRb, 67LR, PDGFRb, etc. However, 67 LR was found to bind to EGCG in the intracellular region. 3) Construction of 67LR and 67LR cell culture medium, EGCG immobilization medium, EGCG cell culture medium and EGCG cell culture medium. The results showed that 67LR EGCG binding, 67LR intracellular protein binding, 67LR protein binding. Now, the prediction of EGCG binding site in 67LR extracellular matrix, the mechanism of EGCG binding site in 67LR extracellular matrix, the mechanism of EGCG interaction and the mechanism of EGCG binding site in 67LR extracellular matrix.