权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

DNA組換・修復における免疫不全症の新規原因遺伝子Artemisの機能解析

免疫缺陷病新致病基因 Artemis 在 DNA 重组和修复中的功能分析

基本信息

批准号：
15790169
负责人：
石合正道
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

RS-SCID免疫不全症の原因遺伝子Artemisと相同性の高い遺伝子が他に2種類存在する(SNM1A、SNM1B、SNM1C/Artemis : SNM1ファミリー)。代表者らの解析により、SNM1ファミリーは二重鎖DNA切断修復に関与するSNM1C/ArtemisとDNA鎖間架橋(ICL)修復に関与するSNM1A、SNM1Bの2つに分かれる(Ishiai et al.2004)。本年度は、樹立した欠損細胞を用いて、DNA修復におけるSNM1ファミリーの分子作用機序を明らかにすることを目的に、まず遺伝学的な検証を行った。SNM1C/Artemisについては、ArtemisとDNA-PKの二重変異細胞を作製し、生体内でArtemisの機能はDNA-PKに依存することを明らかにした。SNM1A、SNM1Bについても同様に遺伝学的検討を行い、SNM1Aは既存のICL修復経路やSNM1Bと独立の新規ICL修復経路であることを証明した(Ishiai et al.2004)。Artemisのリン酸化について、さらに生化学的検討を行った。試験管内でArtemisはDNA-PKと複合体を形成し、リン酸化されることを確認した。一方、生体内ではArtemisは定常状態でリン酸化されていること、放射線照射によりさらにリン酸化を受けることが判明した。生体内でのArtemisのリン酸化酵素の検討を現在進めており、DNA-PK以外の別のキナーゼが関与する事が示唆された。最後に、昨年度検討した、生体内で直接、非相同末端結合(NHEJ)型のDNA修復を検出する系(プラスミ再結合アッセイ)を確立し、Artemisの機能ドメインについて解析を行った。ArtemisのDNA修復機能にはSNM1ドメインと複数のリン酸化部位が必要であることを明らかにした。

The cause of RS-SCID immunodeficiency is Artemis, and there are two different types of Artemis (SNM1A, SNM1B, SNM1C/Artemis : SNM1). Representative analysis of SNM1A, SNM1B and SNM1C/Artemis and DNA interlock bridging (ICL) repair is related to SNM1C/Artemis and DNA double-lock repair (Ishiai et al.2004). This year, we have demonstrated the molecular mechanism of SNM1 gene repair by using DNA repair to establish damaged cells. SNM1C/Artemis is a dual heterotrophic cell that controls Artemis and DNA-PK. Artemis functions in vivo are dependent on DNA-PK. SNM1A and SNM1B are considered to be related to the same genetic research, SNM1A is an existing ICL repair circuit and SNM1B is an independent new ICL repair circuit (Ishiai et al.2004). Artemis is the most important factor in the development of biological research. Artemis confirmed the formation and acidification of the DNA-PK complex in the test tube. In one case, the Artemis in a steady state, and the radiation in the body is not stable. The study of Artemis in vivo is now progressing, and other studies other than DNA-PK are being carried out. Finally, in the past year, direct, non-identical terminal binding (NHEJ)-type DNA repair models in vivo have been established and Artemis function models have been analyzed. Artemis 'DNA repair function is necessary for SNM1 and multiple acidification sites.