感染症に対する内分泌かく乱物質の影響についての研究

内分泌干​​扰物对传染病影响的研究

• 批准号: 15790230
• 负责人: 杉山 圭一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790230/
• 关键词: 細菌内毒素; マクロファージ; NO; iNOS; β-estradiol; alachlor; carbaryl; NF-κB; 感染症; 内分泌かく乱物質; 一酸化窒素

平成15年度に引き続き本年度では、内分泌かく乱物質にβ-estradiolでなくその作用が疑われる農薬のalachlor(ACL)とcarbaryl(NAC)を用いて、マウスのマクロファージ様細胞のRAW264で細菌内毒素(lipopolisaccharide, LPS)により誘導される一酸化窒素(NO)の産生に及ぼす内分泌かく乱物質の影響について検討した。ACLとNACは、β-estradiolと同様にLPSにより誘導されるNO産生とその合成酵素の誘導型NO合成酵素(iNos)遺伝子の発現を濃度依存的に抑制した。LPSによるiNOS遺伝子の発現誘導には、同時に誘導されるinterferon-β(IFN-β)が重要な役割を持つことが報告されている。そこでLPSによるIFN-β遺伝子の転写誘導に及ぼすACLとNACの影響をNortheblot解析及びレポーターアッセイにより検討した。LPSによるIFN-β遺伝子の転写誘導はACLとNACにより抑制された。しかしACLとNACによるiNOS遺伝子の発現誘導の抑制はIFN-βを添加した場合でも完全には解除されなかった。この結果からACLとNACのNO産生の阻害作用には、IFN-βの産生抑制以外の機構の関与が示唆された。IFN-β遺伝子の転写誘導に関与する転写因子NF-κBはiNOS遺伝子の転写誘導にも不可欠な分子である。従ってACLとNACは、LPSによるNF-κBの活性化に影響を及ぼすことでNO産生の誘導を阻害する可能性が考えられる。そこでレポーターアッセイによりNF-κBの活性化レベルを検討したところ、ACLとNACはLPSによるNF-κBの転写活性化を抑制することが明らかとなった。これより、マクロファージでのこれら内分泌かく乱物質によるLPS誘導性NO産生の抑制作用にはNF-κBの活性化阻害が関与することが明らかとなった。

In 2015, the effects of β-estradiol on the production of NO and the effects of endocrine disruptors were investigated, including the use of alachlor(ACL) and carbyl (NAC), the induction of lipopolysaccharide (LPS) in RAW264 cells and the effects of endocrine disruptors. ACL and NAC are similar to LPS, which induces NO production and inhibits the production of inducible NO synthase (iNOS) in a concentration-dependent manner. LPS induces the expression of iNOS gene simultaneously with interferon-β(IFN-β). The effects of LPS on IFN-β gene expression and NAC were analyzed by Northeblot analysis. LPS induces IFN-β gene expression and inhibits ACL and NAC. The inhibition of iNOS gene expression induced by ACL and NAC is completely eliminated when IFN-β is added. The results showed that the inhibition of NO production by ACL and NAC was related to the inhibition of IFN-β production. NF-κB is an essential molecule involved in the induction of IFN-β gene expression. The possibility of inhibiting the activation of NF-κB and the induction of NO by ACL and LPS is examined. The activation of NF-κ B is controlled by ACL and NAC. The inhibition of LPS induced NO production is related to the inhibition of NF-κB activation.