病原性大腸菌における遺伝子・タンパク発現による病原因子の検索

根据致病性大肠杆菌的基因和蛋白质表达寻找毒力因子

• 批准号: 15790235
• 负责人: 木全 恵子
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Toyama Institute of Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790235/
• 关键词: Multiplex PCR; 病原性大腸菌; EHEC

病原性大腸菌は腸管出血性大腸菌、腸管病原性大腸菌、腸管毒素原性大腸菌、腸管侵襲性大腸菌、腸管凝集粘着性大腸菌の5つのカテゴリーに分類される。本研究では病原性大腸菌について病原遺伝子検出による迅速なカテゴリー推定及び機能する病原因子の検出法の開発を目指している。前者の病原遺伝子検出によるカテゴリー推定として、5つのカテゴリー型別を可能とする9種類以上の病原因子遺伝子同時増幅による病原性大腸菌同定は、分離菌の病原性判定だけではなく臨床での迅速な下痢起因病原性大腸菌の診断に応用できる。本年度では病原性大腸菌すべてのカテゴリーを決定するmultiplex PCR法に関して、10種類及び12種類の病原因子を同時に検出できるmultiplex PCR法を確立た。この成果についてはMicrobiology and Immunologyに発表予定である(掲載号49-6)。また、EHEC multiplex PCR系に関しても新規ベロ毒素検出プライマーを開発し、検出系の構築を試みた。この成果に関しては日本細菌学会にて発表(平成16年4月)した。後者の病原因子の検出に関しては、mRNAをモニタリングすることで、感染に重要な役割を担う付着・分泌機能に関与する病原因子等の産生条件を明らかにすることを試みた。そこで、本年度では病原因子発現検出系に関してはリアルタイムPCRを用いて発現パターンの厳密なmRNA定量を検討した。その結果、血清型が異なるEHECでの病原遺伝子発現時におけるmRNA発現パターンがそれぞれ異なることが明らかになった。また、これらのmRNA発現パターンは近年発見された新たな発現制御因子pchの発現パターンと一致していた。これら病原因子の発現条件の解析は、病原因子検出法確立に活用できると同時に簡易な病原性菌の分離法の開発、病原因子の遺伝子発現制御機構の解明への道を開くことが期待される。

Pathogenic escherichia coli カテゴリ に classification される : intestinal hemorrhagic escherichia coli, intestinal pathogenic escherichia coli, intestinal toxigenic escherichia coli, intestinal invasive escherichia coli, intestinal agglutination and adhesion escherichia coli <s:1> 5 カテゴリ カテゴリ に に に に This study で は pathogenicity coliform に つ い て pathogenic heritage 伝 son 検 out に よ る quickly な カ テ ゴ リ ー function of presumption and び す る pathogenic factor の 検 out method の open 発 を refers し て い る. Traces of the former の pathogen 伝 son 検 out に よ る カ テ ゴ リ ー presumption と し て, 5 つ の カ テ ゴ リ ー type don't を may と す る over 9 kinds の pathogenic factor heritage 伝 child rights at the same time picture に よ る pathogenicity coliform bacteria with は, separation の pathogenicity determine だ け で は な く clinical で の quickly な diarrhea cause pathogenicity coliform の diagnosis に 応 with で き る. This year で は pathogenicity coliform す べ て の カ テ ゴ リ ー を decided す る multiplex PCR method に masato し て, 10 species and 12 species の び を pathogenic factors and に 検 out で き る を established た multiplex PCR method. The <s:1> <s:1> results に, に, て, て, Microbiology and Immunologyに were published and approved である(publication No. 49-6). ま た, EHEC multiplex PCR system に masato し て も new rules ベ 検 ロ toxins out プ ラ イ マ ー を open 発 し, 検 is の build を try み た. The に results of the に are related to the て and て published by the Japanese Society of bacteria にて (April 16, Heisei). Youdaoplaceholder3 た. The latter の pathogenic factor の 検 out に masato し て は, mRNA を モ ニ タ リ ン グ す る こ と で, infection に cut を bear important な service う, pay the secretion function, に masato and す る pathogenic factor の conditions を Ming ら か に す る こ と を try み た. そ こ で, this year's で は pathogenic factor 発 検 out now is に masato し て は リ ア ル タ イ ム PCR を with い て 発 now パ タ ー ン の 厳 dense な mRNA quantitative を beg し 検 た. そ の results, serotype が different な る EHEC で の pathogenic heritage 伝 son 発 now に お け る mRNA 発 now パ タ ー ン が そ れ ぞ れ different な る こ と が Ming ら か に な っ た. ま た, こ れ ら の mRNA 発 now パ タ ー ン は recent 発 see さ れ た new た な 発 suppression factor now PCH の 発 now パ タ ー ン と consistent し て い た. こ れ ら pathogenic factor の 発 conditions now の parsing は, pathogenic factor 検 establish に use で き る と に simple な pathogenic bacteria の separation の 発, pathogenic factor の heritage 伝 son 発 system now royal institution の interpret へ の way を open く こ と が expect さ れ る.

项目成果

下痢患者からのstx2f遺伝子保有志賀毒素産生性大腸菌O128:HNMの分離

从腹泻患者体内分离出携带 stx2f 基因的产志贺毒素大肠杆菌 O128:HNM

• 发表时间: 2004
• 期刊: 感染症学雑誌 78・12
• 作者: 磯部 順子

Rapid categorization of pathogenic Escherichia coli by multiplex PCR

• DOI: 10.1111/j.1348-0421.2005.tb03752.x
• 发表时间: 2005-01-01
• 期刊: MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
• 影响因子: 2.6
• 作者: Kimata, K;Shima, T;Nagai, Y
• 通讯作者: Nagai, Y