悪性黒色腫の新たな遺伝子治療の開発
恶性黑色素瘤新基因疗法的开发
基本信息
- 批准号:15790584
- 负责人:
- 金额:$ 2.3万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2003
- 资助国家:日本
- 起止时间:2003 至 2004
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
悪性黒色腫はメラノサイト系の悪性腫瘍で、早期から転移を起こしやすい悪性度の高い腫瘍である。これまでの報告で悪性黒色腫で報告された遺伝子異常の9割以上は、p16/p15,CDK4/6サイクリンD経路に関係する遺伝子異常であり、その増減により細胞周期が促進される方向に働いていると予想されている。従って、細胞周期に抑制的に働く因子で、p16/p15,CDK4/6サイクリンD経路に関係しない分子としてPLZF(promyelocytic leukemia zinc finger)に注目し解析を行った。ヒト悪性黒色腫由来細胞株13種におけるPLZFの発現をRT-PCR, northern brot, real time PCR法を用いて検討したところ、すべて発現は検出限度以下であった。いっぽう、正常ヒト由来メラノサイトではPLZFは発現されていた。そこで、13種のメラノーマ細胞株のうち4種類を選択し、PLZF遺伝子を強制発現させたところ、ベクターのみを発現させた細胞と比較して細胞増殖の抑制が40-70%認められた。PLZF遺伝子導入されたメラノーマ細胞株では細胞周期関連蛋白であるサイクリンA,サイクリンDの発現が抑制されていること確認した。最後に、PLZFの腫瘍抑制効果がin vivoにおいてもみられるかについて、SCIDマウスへの移植実験で解析した。PLZF遺伝子導入細胞4種、コントロールベクター導入細胞4種をそれぞれSCIDマウスの背部皮下に移植し、経時的に腫瘍の大きさを測定した。コントロールベクター導入細胞と比較してPLZF遺伝子導入細胞では腫瘍のサイズは30日後で8-30%,60日後で17-44%と著名に腫瘍形成が抑制されていた。以上の結果より、転写抑制遺伝子であるPLZFはメラノーマの遺伝子治療に有効であることが予想された。
The sex of black tumors is different from the sex of black tumors in the early stage. This report is based on the analysis of cell cycle abnormalities and cell cycle progression. The results are as follows: 1. Cell cycle abnormalities and cell cycle progression. The molecular relationship between promyocytic leukemia zinc finger (PLZF) and cell cycle inhibition factors, p16/p15, CDK4/6, was analyzed. The expression of PLZF in 13 cell lines was detected by RT-PCR, northern brot, real time PCR. The reason for this is that the PLZF is not present. The inhibition of cell proliferation was 40-70% in all 4 species of PLZF gene under stress. PLZF gene introduced into the cell line was confirmed to inhibit the expression of cell cycle-related protein A and D. Finally, PLZF tumor-inhibiting effects were analyzed in vivo and SCID in vivo. 4 kinds of PLZF gene introduced cells and 4 kinds of PLZF gene introduced cells were tested in SCID and subcutaneous transplantation. After 30 days, PLZF gene was introduced into the cells. After 60 days, PLZF gene was introduced into the cells. After 30 days, PLZF gene was introduced into the cells. After 30 days, The above results show that the PLZF has a negative effect on the gene therapy.
项目成果
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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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