ゲノムインプリンティング異常モデルマウスの作製

基因组印迹异常小鼠模型的构建

• 批准号: 15700318
• 负责人: 鈴木 智広
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15700318/
• 关键词: ミュータジェネシス; ゲノムインプリンティング

昨年度同様に、20個体のC57BL6系統雄個体にENU投与を行い、同系統との交配により得られたG1世代雄45個体と同C57BL6系統雌個体との交配によりG2世代雌個体を各G1雄当たり4個体を得た。さらにG1世代とG2世代のマウスを交配して各G1当たり平均55個体(♀27/♂28)のG3世代を生産した。18から24日齢のG3世代雌,166個体について過排卵処理を施し、昨年度確立した方法により得られた卵子のゲノムインプリンティング遺伝子のメチル化レベルを各G3個体ごとに解析した。上記スクリーニング個体のうち、H19遺伝子について60個体、Peg1遺伝子について92個体、peg3遺伝子について139個体についてメチル化レベルの異常が検出された。詳細な解析を行うため、これら異常サンプルについて、今年度新たに導入したパイロシークエンス法によりPCRテンプレート中に含まれる複数のCpGサイトでのメチル化レベルの測定を行った。正常なC57BL6雌マウス95個体から採取した卵子のメチル化レベルを基準とし、上記異常G3サンプルのメチル化レベルを比較した結果、H19遺伝子について2サンプル、Peg1遺伝子について1サンプル、Peg3遺伝子について2サンプルが明らかに基準から外れる異常なメチル化レベルを示すことが判明した。各遺伝子についてのこれらの異常サンプルは2個体の卵子より由来していた。つまり1個体はH19,Peg1,Peg3全てについてそのメチル化レベルが異常であり、もう1個体はH19とPeg3についてそのメチル化レベルが異常であった。現在までの所、上記G3個体と同リターのG3個体からはその他1個体も異常メチル化レベルを示す個体が検出されていないため、その遺伝性は不明である。

Last year, 20 male individuals of the C57BL6 system, にENU, were married to を行い, and 20 males of the same system were mated to られたG1 Generation 45 male individuals are mated with C57BL6 system female individuals, and G2 generation female individuals are obtained by mating each G1 male with 4 individuals.さらにG1 generation and G2 generation のマウスを mating して Each G1 is an average of 55 individuals (♀27/♂28) のG3 generation を production した. 18-24-day-old G3 generation female, 166 individuals were treated with ovulation, and the method established last year wasのゲノムインプリンティング伝子のメチル化レベルをeach G3 individual ごとにanalyticsした. The above records are the スクリーニング individual のうち, the H19 legacy 伝子について 60 individuals, and the Peg1 legacy 伝子について92 individuals, peg3 remaining 伝子について139 individuals についてメチル化レベルの abnormal が検出された. Detailed analysis of を行うため, これら abnormal サンプルについて, this year's new たに imported したパイロシークエンス法によりPCRテンプレート中に containまれるpluralのCpGサイトでのメチル化レベルのdeterminationを行った. Normal なC57BL6 female マウス95 individual からtake したovum のメチル化レベルを standardとし, the above abnormal G3 サンプルのメチル化レベルを comparison result, H19 legacy child について2サンプル、Peg1弝子について1サンプル、Peg3弝子について2サンプルが明らかにbaselineから外れる abnormal なメチル化レベルをshow すことが clarificationした. The origin of each remaining egg is the origin of each individual's egg.つまり1 individual はH19, Peg1, Peg3 all てについてそのメチル化レベルが abnormalityであり, もう1 individual はH19とPeg3 についてそのメチル化レベルが abnormal であった. Now the G3 individual mentioned above is abnormal The メチル化レベルをshows the individual が検出されていないため, and the その伝性は remains unknown である.