樹状細胞に発現するレクチン型受容体ファミリーの機能解析と疾患との関与

树突状细胞表达的凝集​​素型受体家族的功能分析及其与疾病的关系

• 批准号: 16790221
• 负责人: 古川 宏
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790221/
• 关键词: 樹状細胞; 細胞膜受容体; リガンド

患者や疾患モデル動物における遺伝学的研究から、II型膜蛋白に属するレクチン型受容体が密集している染色体領域NKC(ヒト染色体12p13マウス染色体6)が自己免疫疾患の発症に関与していると考えられている。同様に、免疫グロブリンスーパーファミリーに属するI型膜蛋白のSLAMファミリー受容体が密集している領域Sle1b(ヒト染色体1q23マウス染色体1)の関与も報告されている。樹状細胞は抗原提示細胞であり、自己免疫疾患においても重要な役割を果たしているが、上記の遺伝子座には樹状細胞に発現している受容体も多数存在しているが、それらの遺伝子の疾患発症における役割も不明である。本研究の目的は、自己免疫疾患感受性染色体領域に遺伝子があり、樹状細胞に発現している細胞膜受容体を解析することである。これらの細胞膜受容体遺伝子の解析により、多因子疾患である自己免疫疾患の発症機序にこれらの受容体がどう関わっているかを知ることができる。まず、これらの遺伝子の発現と、多型を自己免疫疾患モデルマウスと、健常マウスで比較し、候補遺伝子を絞り込んだ。加えて、レポータージーンアッセイ用いた方法でリガンドを同定するべく、樹状細胞の受容体の細胞外部分と膜貫通部分にCD3ζ鎖の細胞質部分を繋いだキメラ分子をコードするコンストラクトを作成した。これを用いてリガンド発現細胞をスクリーニングするために、NFATで働くレポーター細胞を作成した。また、樹状細胞の受容体に対するモノクローナル抗体を作成し、自己免疫疾患モデルマウスに投与することにより、これらの受容体の自己免疫疾患発症における役割を解析した。作成した抗体の投与はモデルマウスの発症に明らかな影響を及ぼさなかったが、さらに他の受容体に対する抗体も作成している。

患者和疾病模型动物的遗传研究表明，NKC染色体区域NKC（人类12p13小鼠染色体6染色体染色体），含有属于II型膜蛋白的凝集素型受体，与自身免疫性疾病的发展有关。同样，已经报道了属于免疫球蛋白超家族的I型膜蛋白的大型家族受体的SLE1b（人类1q23小鼠染色体1染色体染色体）的参与。树突状细胞是抗原呈现细胞的，在自身免疫性疾病中起重要作用，但是尽管在上述基因座的树突状细胞中表达了许多受体，但这些基因在疾病发展中的作用也未知。这项研究的目的是分析在自身免疫性疾病敏感染色体区域中包含基因的细胞膜受体，并在树突状细胞中表达。可以看到对这些细胞膜受体基因的分析，以表明这些受体如何参与发展自身免疫性疾病的机制，一种多因素疾病。首先，比较了自身免疫性疾病和健康小鼠的小鼠模型之间这些基因和多态性的表达，并缩小了候选基因。此外，创建了编码编码CD3ζ链细胞质部分与树突细胞受体的细胞外和跨膜部分联系的嵌合分子的构造，以使用记者基因分析使用的方法来识别配体。这用于筛选表达配体的细胞，生成了在NFAT中工作的报告细胞。此外，制备了对树突状细胞中受体的单克隆抗体并针对小鼠模型自身免疫性疾病，并分析了这些受体在自身免疫性疾病发展中的作用。产生的抗体的给药对模型小鼠的发展没有明显的影响，但也已经产生了针对其他受体的抗体。