腎尿細管細胞のマグネシウム輸送担体のクローニング
肾小管细胞中镁转运蛋白的克隆
基本信息
- 批准号:16790476
- 负责人:
- 金额:$ 1.34万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2004
- 资助国家:日本
- 起止时间:2004 至 2006
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1.マグネシウム(Mg)輸送蛋白質の候補遺伝子のスクリーニング:作製したMg耐性細胞と対照野性株細胞より各々mRNAを抽出してcDNAを合成した。これらを用いてDNAマイクロアレイを用いて両細胞の遺伝子を比較し、Mg耐性細胞に特異的に発現が増加している遺伝子を選出した。200個近くの候補遺伝子が認められた。その中で、既知の遺伝子が52個ほど同定された。残りは機能未知の遺伝子であった。現在各々の遺伝子について機能・発現を検討しているところである。2.Mg輸送蛋白質の同定:上記遺伝子の中から、Mg輸送活性を示す可能性がある膜タンパク質を選出した。CRR-9(Cisplatin-resitance related genes)遺伝子のcDNAを動物細胞一過性発現ベクターに組み込み、リポフェクチン法を用いて野生体細胞に遺伝子導入した。各々の細胞内Mgイオン濃度測定を行った。Mgイオン濃度は蛍光Mg指示薬furaptraのAM体を細胞に導入し、その350nm励起及び380nm励起蛍光の強度比から細胞内Mgイオン濃度を求めた。遺伝子導入した細胞でのMg輸送活性は野性株と比して変化を示さなかった。しかしながら、ノザンブロット法によるmRNA量を耐性細胞と野性株を比較すると、明らかに耐性細胞ではmRNAの増加を認めた。そのため、間接的にCRR-9はMg輸送活性に影響を与えている可能性が示唆された。その他にHSPC299, lymphocyte Hexosaminidase A, SREBP-1, TRIP9が候補遺伝子として考えられたため、同様に一過性発現ベクターに組み込み野性株に遺伝子導入した。Mg耐性の獲得を得られるか検討したが、高Mg培養液での耐性は得られなかった。
1. マ グ ネ シ ウ ム (Mg) transport protein の alternate heritage 伝 son の ス ク リ ー ニ ン グ : cropping し た Mg patient cell と polices according to wild plant cells よ り each 々 mRNA を spare し て cDNA を synthetic し た. こ れ ら を with い て DNA マ イ ク ロ ア レ イ を with い て struck cells の heritage 伝 を comparing し, Mg patient cell に specific に 発 now が raised し て い る heritage 伝 son を elected し た. 200 nearly く <s:1> reserve 伝 child が recognize められた. In そ そ, there are で, known relics 伝 and が of 52 ほ <s:1> determinations された. The function of the residual character 伝 is unknown. The cultural heritage 伝 is であった. At present, each 々 cultural heritage 伝 sub-site に ると て て functions and developments を検 for て て ると ると ろである ろである ろである ろである ろである ろである. 2. の Mg transport protein might be: written legacy 伝 child の か ら, Mg delivery activity を す possibility が あ る membrane タ ン パ ク qualitative を elected し た. CRR - 9 (Cisplatin - resitance related genes) posthumous son 伝 の cDNA を animal cell transient 発 now ベ ク タ ー に group み 込 み, リ ポ フ ェ ク チ を ン method with い て traces of wild somatic に 伝 son import し た. The concentration of Mg in each 々 <s:1> cell was determined by を and った. Mg イ オ ン concentration は 蛍 light Mg instructions 薬 furaptra の AM に import し を cells, そ の 350 nm excitation and び 380 nm wound up 蛍 の intensity than か ら cell Mg イ オ を ン concentration o め た. The 伝 plasmid was introduced into the た た cells. The <s:1> Mg delivery activity of the wild strain と was more than that of the <s:1> て, and the を showed さな った った った った. し か し な が ら, ノ ザ ン ブ ロ ッ ト method に よ る mRNA を patience cells と wild strains を compare す る と, Ming ら か に patience cells で は mRNA の raised plus を recognize め た. そ の た め, indirect に CRR - 9 は Mg を active に passenger transportation and え て い が る possibility in stopping さ れ た. そ の he に HSPC299, lymphocyte Hexosaminidase A, SREBP - 1, TRIP9 が alternate heritage 伝 son と し て exam え ら れ た た め, with others in に transient 発 now ベ ク タ ー に group み 込 み traces of wild strains に 伝 son import し た. Mg tolerance is obtained by を. Youdaoplaceholder1 検 is sought for たが. High Mg culture medium で has <s:1> tolerance and られな った is obtained.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Interaction of a farnesylated protein with renal type IIa Na/Pi co-transporter in response to parathyroid hormone and dietary phosphate.
法尼基化蛋白与肾 IIa 型 Na/Pi 协同转运蛋白的相互作用,响应甲状旁腺激素和膳食磷酸盐。
- DOI:
- 发表时间:2004
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Takefumi Itoh;Noritoshi Nagaya;Shinsuke Murakami;Kaoru Hamada;Kenji Kangawa;Hiroshi Kimura;Zhang Ying;Takada Takuma;Nishimoto Goro;Yaoita Eishin;Yoshida Yutaka;Katsuya Ken;Jun Zou;Saito H;Ito M;Ito M;Miyamoto K;Nashiki K;Ito M
- 通讯作者:Ito M
Most patients with coronary artery calcification have no coronary artery stenosis and hyperphosphatemia should be important in reevaluating the K/DOQI guidelines.
大多数冠状动脉钙化患者没有冠状动脉狭窄,高磷血症对于重新评估 K/DOQI 指南非常重要。
- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Yamazaki M;Suzuki A;Ozono K;Michigami T.;Yokoyama K
- 通讯作者:Yokoyama K
Enhanced sodium-dependent extrusion of magnesium in mutant cells established from a mouse renal tubular cell line.
在小鼠肾小管细胞系建立的突变细胞中增强了钠依赖性镁的排出。
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Watanabe M;Konishi M;Ohkido I
- 通讯作者:Ohkido I
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岡部 正隆
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