植物の微小管付随タンパク質の制御機構
植物微管相关蛋白的调控机制
基本信息
- 批准号:05F05451
- 负责人:
- 金额:$ 1.54万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 2006
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
微小管の様々な構造や機能は微小管に結合する多くの微小管付随タンパク質(microtubule-associated proteins ; MAPs)により制御されている。動物細胞や酵母を用いた研究により、MAPSは機能分化した複合体を形成するとともに、それぞれのMAPは主にリン酸化により微小管結合活性などが調節されている。本研究では、微小管機能を制御するフォスファターゼについて、それらの機能と生体内の基質を調べる実験を行った。MAP kinase phosphatase PHS1のdominant negative変異株phsl-1の微小管変異表現型を相補するPHS1内のサブレッサー変異を遺伝学的に複数同定している。これらのサプレッサー変異をもつPHS1が通常のフォスファターゼ活性を持つかどうか調べるために、数種類の変異型組換えタンパク質を大腸菌で発現させた。組換えPHSlは不溶性になり易いため、融合するタグ蛋白質の種類を検討した。微小管の安定性に影響を与える3つのフォスファターゼと関連タンパク質(PHS1,TON1,TON2)を遺伝子発現誘導系により、アラビドブシス植物体で強制発現又は発現抑制を試みる。しかし、形質転換植物体ではこれらのフォスファターゼはほとんど発現しなかった。phs1-1変異株の根端部位においてリン酸化状態が野生型と異なるタンパク質をリン酸化蛋白質の濃縮後、二次元電気泳動により調べ、一部の候補蛋白質をMS分析により同定した。
The structure and function of microtubes are controlled by microtube-associated proteins (MAPs). The study of animal cells and yeast showed that MAPS could regulate the activity of microtubule binding in the formation of functional differentiation complexes. In this study, microtubule function was controlled and regulated in vivo. MAP kinase phosphatase PHS1 dominant negative variant phsl-1 microtubule variant phenotype complementary to the microtubule variant within PHS1 This is the case with PHS1, which is commonly used in the production of Escherichia coli. The type of protein that is insoluble in PHS1 is discussed. The stability of microtubule is influenced by the relationship between microtubule quality (PHS1,TON1,TON2) and the induction system of microtubule development. The stress development and inhibition of microtubule development in plants are studied. The plant body changes shape and quality, and the plant body changes shape and quality. phs1 -1 mutant root tip site acidification status from wild type to mutant protein acidification protein concentration, secondary electrophoresis, MS analysis of a part of the candidate protein identity
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Twisted growth and organization of cortical microtubules
- DOI:10.1007/s10265-006-0039-y
- 发表时间:2007-01-01
- 期刊:
- 影响因子:2.8
- 作者:Ishida, Takashi;Thitamadee, Siripong;Hashimoto, Takashi
- 通讯作者:Hashimoto, Takashi
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