遺伝子治療の最適化を目指したバイオコンジュゲート化アデノウイルスベクターの創製

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本研究は、安全性の高いバイオマテリアルであるポリエチレングリコール(PEG)によるアデノウイルスベクター(Ad)表面のバイオコンジュゲーションにより、Adの優れた遺伝子導入効率・発現効率を損ねることなく、ターゲティング能を有し、Adの欠点のみを克服したハイブリッド化Adの創製を目的としている。本年度は、昨年度までに見出した.PEG修飾Ad(PEG-Ad)のEPR効果(Enhanced permeability andretention effect)による受動的癌ターゲティングに関して、その転移癌への適用を試み、肺転移癌モデルマウスを用いた治療検討に取り組んだ。さらに、PEG-AdのPEG鎖先端にトランスフェリンを付与した標的指向化Adの創製を試みた。昨年度までの検討で開発した5K/PEG-Ad (PEG分子量5,000、修飾率90%)と20K/PEG-Ad (PEG分子量20,000、修飾率45%)に治療遺伝子を搭載し、肺転移癌モデルとして汎用されるB16BL6メラノーマ肺転移癌モデルマウス並びにCT26肺転移癌モデルマウスに対して単回全身投与したところ、未修飾Adと比較して有意な肺転移癌治療効果を示した。本結果より、PEG-Adは、転移癌をも標的とし得る全身投与型ベクターの有望な候補であることが判明した。また、腫瘍への能動的ターゲティングを目指して、PEG鎖先端に腫瘍指向性分子として汎用されるトランスフェリン(Tf)を付与したPEG-Ad (Tf-PEG-Ad)を創製し、Tf発現細胞における遺伝子発現特性を評価した。その結果、Tf-PEG-AdはTf受容体を介してPEG-Adより高い遺伝子発現活性を有することを明らかとした。したがって、今後TfやPEGの修飾率を最適化することで、さらに効率の良いターゲティングを達成し得る可能性が示唆された。