バクテリオシンの環状化と抗菌性発現機構の解明

阐明细菌素环化和抗菌表达机制

• 批准号: 17780055
• 负责人: 川井 泰
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17780055/
• 关键词: バクテリオシン; 乳酸菌; Lactobacillus gasseri; D-アミノ酸; 環状ペプチド

昨年度は、ヒト乳児糞便由来のLactobacillus gasseri LA39により生産される環状バクテリオシン(ガセリシンA)の構造遺伝子および関連遺伝子群の全塩基配列を解明し、自己免疫遺伝子(gaaI)を組み込んだ発現ベクターを構築後、L.gasseri基準株へのホモ発現に成功した。本年度は、ガセリシンAの最小発現領域の決定を試みた。ガセリシンAオペロン(約3.5kbp、7つのORFより構成されている、FO)と上流のORFを1つ(F1)もしくは2つ(F2)欠損させたオペロン領域の、計3遺伝子断片をPCRにより取得し、それぞれオランダ・フローニンゲン大学で作成された発現ベクター(pIL253-P32)に組み込み、乳酸球菌(Lactococcus lactis ssp.cremoris MG1363)にエレクトロポレーションした。次いで、得られた構築ベクターをL.gasseri基準株にエレクトロポレーションして、選抜株を取得した。その結果、F1発現ベクターはMG1363株へ、F2発現ベクターはMG1363株とL.gasseri基準株への導入に成功したが、いずれの培養上清中にも、バクテリオシン活性は見出されなかった。また、全オペロン(FO)を組み込んだ発現ベクターはMG1363株の時点で得られず、本領域は致死性である可能性が高く、バクテリオシン発現の最小領域と考えられた。現在、発現ベクターを変更して、FOについて再実験中である。

Last year, Lactobacillus gasseri LA39 was successfully identified as A reference strain of L.gasseri after the construction of a complete base sequence of structural genes and related gene subgroups for the production of a cyclic gene (A), a self-immune gene (gaaI), and the development of a genetic component of L.gasseri LA39. This year, we will try our best to determine the minimum occurrence area of "" A.ガセリシンAオペロン(Approx. 3.5kbp, 7 ° ORF Fragment Composition) Upstream ORF 1 ° (F1) ° (F2) ° (F1) ° (F2) ° (F2) ° (F3) ° (F3 ° (F3) ° (F4) ° (F3 ° (F3) ° (F3 ° (F2) ° (F3 ° (F3) ° (F3 ° (F3 °)) ° (F3 ° (F3 ° ((pIL253-P32), Lactococcus lactis ssp.cremoris MG1363 In the second place, the construction of L.gasseri reference plant was carried out. As a result, F1 and F2 were successfully introduced into the culture supernatant of MG1363 strain and L.gasseri strain respectively, and the activity of MG1363 strain and L.gasseri strain was detected. The possibility of lethality in this field is high, and the smallest field of occurrence is examined. Now, it appears that you have changed your mind, FO has changed your mind, and you have changed your mind.

项目成果

環状バクテリオシンの発見とその利用性

环状细菌素的发现及其用途

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本乳酸菌学会誌 第16巻・2
• 作者: 荒川健佑;川井 泰;齋藤忠夫
• 通讯作者: 齋藤忠夫

ヒト腸管系乳酸菌が生産するガセリシンA/Tの構造と機能特性

人肠道乳酸菌产生的gasericin A/T的结构和功能特性

• 发表时间: 2006
• 期刊: 日本乳酸菌学会誌 第17巻・1
• 作者: 川井 泰;高橋涼子;荒川健佑;齋藤忠夫
• 通讯作者: 齋藤忠夫