樹状細胞指向型リポソームを用いた新規DNAワクチン療法の開発

使用树突状细胞定向脂质体开发新型 DNA 疫苗疗法

• 批准号: 17790119
• 负责人: 川上 茂
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790119/
• 关键词: 遺伝子治療; DNAワクチン; 遺伝子デリバリー; 樹状細胞; ターゲティング; 癌; リポソーム; カチオン性リポソーム

本研究の目的は、in vivoにおいてDNAワクチン療法を実現するための新規ターゲティング型非ウィルス性遺伝子導入キャリアを開発することである。これまでの多くの遺伝子キャリアはin vitroを基盤として開発されていて、生体内に投与後、標的部位で発現するまでの様々な障壁については考慮されiていないのが現実である。本年度は、昨年度最適化をおこなった遺伝子導入キャリア、マンノース修飾リボソームを用いてDNAワクチンへの応用を検討した。抗原タンパク質としてOVAをコードするプラスミドDNAを用い、発現能の確認を目的にマンノース修飾リボソームとの複合体をDC2.4細胞に遺伝子導入をおこなったところ、非修飾カチオン性リボソームと比較し有意な取り込み量の増大および発現の増大が認められた。次にin vivoに適用しCTL活性を評価したところ、一般的なDNAワクチン療法で用いられるプラスミドDNA単独の筋肉内投与と比較し、マンノース修飾リボソームとの複合体の腹腔内投与により有意に高いCTL活性を得た。最後に担がんマウスを用いてDNAワクチンによる治療効果を評価するため生存期間を測定したところ、非修飾リボソームとの複合体またはプラスミドDNA単独で投与した場合に比べ、マンノース修飾リボソームとの複合体投与により有意な生存期間延長が認められた。以上、論理的にin vivoでの遺伝子導入キャリアの設計をおこなうことにより我々が開発したマンノース修飾リボソームがDNAワクチン製剤として有用なキャリアとなりえることが示された。

The aim of this study is to develop new methods for the in vivo DNA gene therapy. This is because many of the molecules are released from the substrate in vitro and developed in vivo, and after injection and target parts are developed in vivo, the barrier is considered to be present. This year's optimization of the DNA sequence is discussed. Antigen gene expression and protein expression in DC2.4 cells were determined by DNA sequencing, protein expression and protein expression. In vivo, CTL activity was evaluated using DNA therapy alone compared with intraperitoneal administration of DNA complex. Finally, the treatment effect was evaluated. The survival time was determined. The complex was modified. The survival time was determined. The above logic is in vivo and the gene is introduced into the gene. The gene is introduced into the gene.

项目成果

Basic fibroblast growth factor-binding peptide as a novel targeting ligand of drug carrier to tumor cells

• DOI: 10.1080/10611860600849498
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: JOURNAL OF DRUG TARGETING
• 影响因子: 4.5
• 作者: Terada, Takeshi;Mizobata, Miki;Hashida, Mitsuru
• 通讯作者: Hashida, Mitsuru

Evaluation of proinflammatory cytokine production induced by linear and branched polyethylenimine/plasmid DNA complexes in mice

• DOI: 10.1124/jpet.105.100669
• 发表时间: 2006-06-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Kawakami, Shigeru;Ito, Yoshitaka;Hashida, Mitsuru
• 通讯作者: Hashida, Mitsuru

Efficient gene transfer into macrophages and dendritic cells by in vivo gene delivery with mannosylated lipoplex via the intraperitoneal route

• DOI: 10.1124/jpet.106.105098
• 发表时间: 2006-08-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Hattori, Yoshiyuki;Kawakami, Shigeru;Hashida, Mitsuru
• 通讯作者: Hashida, Mitsuru

Effect of mannose density on mannose receptor-mediated cellular uptake of mannosylated O/W emulsions by macrophages.

• DOI: 10.1016/j.jconrel.2006.04.010
• 发表时间: 2006-08
• 期刊: Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society
• 作者: Wassana Yeeprae;S. Kawakami;F. Yamashita;M. Hashida

Intracellular trafficking is the important process that determines the optimal charge ratio on transfection by galactosylated lipoplex in HEPG2 cells

细胞内运输是决定 HEPG2 细胞中半乳糖基化脂质体转染最佳电荷比的重要过程

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biological ＆ Pharmaceutical Bulletin 29(9)
• 作者: Naoki Inoue;Kaoru Kobayashi;et. al.;K.T.Suzuki;H.Naranmandura;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;K.T.Suzuki;A.Franke;K.T.Suzuki;Yoshiyuki Hattori et al.;Yoshiyuki Hattori et al.;Shigeru Kawakami et al.;Takeshi Terada et al.;Wassana Yeeprae et al.;Yasunori Saito et al.
• 通讯作者: Yasunori Saito et al.