悪性グリオーマにおけるDNA二重鎖切断修復遺伝子制御による新規放射線療法の開発

开发基于DNA双链断裂修复基因调控的恶性胶质瘤新放射疗法

• 批准号: 17790974
• 负责人: 原田 広信
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790974/
• 关键词: Ku70; Ku80; siRNA; HVJ-E vector; グリオーマ

DNA二重鎖切断の重要な修復機構である「非相同末端結合修復」に関わるKu70及びKu80の悪性グリオー射線抵抗性への関与を解明し、Ku70及びKu80に対するsiRNAを用いてDNA修復機構を制御することが、悪性グリオーマの放射線感受性をさらに高めた新たな治療法と成り得るか否かを検討した。これまでに、グリオーマ手術標本を用いて、DNA修復関連遺伝子が悪性グリオーマにおいて過剰に発現し、放射線治療抵抗性の主因であることを報告してきた。そこでKu70及びKu80に対するsiRNAを作成し、グリオーマ細胞株におけるKu70及びKu80 mRNA/蛋白発現が抑制されることを確認し、今後のヒトへの臨床応用を目指して、HVJ-Eベクターを用いた導入実験を行った。まず、導入効率及び細胞毒性の検討を行い、次にグリオーマ細胞株においてHVJ-EベクターによりKu70及びKu80に対するsiRNAを導入し、colony forming assayを用いて放射線作用増強効果を確認した。In vivo実験ではヒトグリオーマ皮下腫瘍モデルを作成し、HVJE-vectorにより高率に導入されたKu70及びKu80に対するsiRNAより放射線治療効果が増強されることを確認した。HVJ-Eベクターを用いてKu70及びKu80 siRNAを導入することで、安全にDNA修復機構を制御でき、ヒト悪性グリオーマにおける放射線感受性を高めた新たな治療法と成り得る可能性を証明した。

DNA double-lock repair mechanisms are important for "non-identical terminal binding repair" related to Ku70 and Ku80 radiation resistance and understanding, Ku70 and Ku80 for siRNA use in DNA repair mechanisms to control radiation sensitivity, high sensitivity and new therapeutic methods. The main reason for radiation therapy resistance is that DNA repair is related to gene expression. To confirm the inhibition of Ku70 and Ku80 mRNA/protein expression in cell lines, and to provide guidance for future clinical use of HVJ-E. The effect of introducing siRNA into HVJ-E cell line Ku70 and Ku80 was confirmed by colony forming assay. In vivo, the production of subcutaneous tumor cells, HVJE-vector, high rate of introduction of Ku70 and Ku80 siRNAs, and increased effectiveness of radiation therapy were confirmed. HVJ-E is used to introduce Ku70 and Ku80 siRNAs, which are safe for DNA repair mechanisms, and to demonstrate the possibility of new therapeutic methods for radiation sensitivity.

项目成果

PTEN gene transfer suppresses the invasive potential of human malignant gliomas by regulating cell invasion-related molecules.

• DOI: 10.3892/ijo.29.1.73
• 发表时间: 2006-07
• 期刊: International journal of oncology
• 影响因子: 5.2
• 作者: Koji Furukawa;Y. Kumon;H. Harada;S. Kohno;S. Nagato;Mikio Teraoka;Satoshi Fujiwara;Kou Nakagawa;K. Hamada;T. Ohnishi

Silencing hypoxia-inducible factor-lalpha inhibits cell migration and invasion under hypoxic enviroment in malignant gliomas.

沉默缺氧诱导因子-lα可抑制恶性胶质瘤缺氧环境下的细胞迁移和侵袭。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Int J Oncol 30
• 作者: Fujiwara S;Nakagawa K;Harada H;et al.
• 通讯作者: et al.

Downregulation of laminin α4 chain expression inhibits glioma invasion in vitro and in vivo

• DOI: 10.1002/ijc.21102
• 发表时间: 2005-10-20
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 6.4
• 作者: Nagato, S;Nakagawa, K;Ohnishi, T
• 通讯作者: Ohnishi, T