ストレスホルモン分泌制御異常誘発モデルを用いた扁桃体ニューロンの分子・形態相関

使用应激激素分泌失调诱导模型研究杏仁核神经元的分子和形态关系

基本信息

批准号：
17700335
负责人：
坂本浩隆
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17700335/
关键词：
PTSD ストレス扁桃体 SPS ニューロペプチドY ELISA 免疫染色 Lucifer yellow

项目摘要

過剰なストレス負荷によって影響を受ける神経基盤の詳細な解析を行うためには、優れたモデル動物の選択が不可欠である。そこで本研究では、グルココルチコイド分泌制御異常(誘発)モデル動物として短期持続ストレス(Single Prolonged Stress ; SPS)負荷ラットを採用した。SPS負荷ラットは心的外傷後ストレス障害(PTSD)として学際的にも認められているモデルであり、SPSを負荷されたラットではPTSD患者と同様の長期的な視床下部-下垂体-副腎系のCORT分泌制御異常(ネガティブフィードバック制御の過剰亢進)が誘発される。本研究では、このSPS負荷ラットを用いてCORT分泌制御異常が脳内のどの領域に依存しているか、また特定の神経回路連絡に変化があるのかなどを神経回路網レベルで解析した。まず、競合ELISA法を用いて各脳部位(扁桃体、海馬、前部帯状回、視床下部)において、不安行動に関係が深いとされている神経ペプチドであるニューロペプチドY(NPY)の濃度を測定した結果、SPS負荷ラットにおいて扁桃体領域のみでNPY濃度が有意に増加していた。免疫組織化学的解析の結果、SPS負荷したラット扁桃体領域の中では、基底外側核において特異的にNPY免疫陽性線維が増加していた。次に、過剰なストレス負荷が脳内神経回路網に及ぼす影響を、扁桃体領域、特に情動記憶にかかわる回路において中心的役割を果たしていると考える基底外側核(BLA)と中心核(CeA)に着目し、Lucifer yellowを単一細胞内注入標識によって形態学的な解析を行った。その結果、SPSを負荷したラット扁桃体BLAの錐体細胞の樹状突起の分岐数と長さが有意に増加していたが、CeAの神経細胞の樹状突起には形態的な有意な差が認められなかった。これらの扁桃体BLAニューロンにみられた形態変化から、情動反応の求心性入力が増加している可能性が示唆され、PTSDにみられる恐怖、不安の情動反応の異常へ関与すると考えられた。

选择优秀模型动物对于详细分析受到过度压力负荷影响的神经底物至关重要。因此，在这项研究中，我们采用了短期持续应激（SP）负载大鼠作为糖皮质激素分泌失调（诱导）动物的模型。载有SPS的大鼠是一种模型，在下丘脑甲状腺肾上腺肾上腺肾上腺肾上腺系统系统中，载有SPS的长期Cort分泌异常（过度增强的负反馈控制）的大鼠被认为是创伤后应激障碍（PTSD）的模型，与PTSD患者相似。在这项研究中，我们在神经网络水平上进行了分析，例如根据大脑中哪个区域以及特定神经回路通信的变化，诸如异常的Cort分泌调节。 First, we measured the concentration of neuropeptide Y (NPY), a neuropeptide that is said to be closely related to anxiety behavior in each brain region (amygdala, hippocampus, anterior cingulate gyrus, and hypothalamus) using a competitive ELISA method, and found that NPY concentrations increased significantly in the amygdala region alone in SPS-loaded rats.免疫组织化学分析表明，在带有SPS的大鼠的杏仁核区域的基底外侧核中，NPY免疫阳性纤维被明确增加。接下来，我们专注于基底外侧核（BLA）和中央核（CEA），这些核（CEA）考虑了过度压力对大脑神经网络的影响，在杏仁核区域中起着核心作用，尤其是在情感记忆中涉及的电路中，以及使用单个细胞内注射的封闭式注射式贴封型在形态学上分析的Lucifer Lucifer黄色。结果，带有SPS的大鼠杏仁核BLA中锥体细胞的树突分支的数量和长度显着增加，但在CEA神经元中没有明显的形态差异。杏仁核BLA神经元中看到的这些形态学变化表明，情绪反应的传入输入可能会增加，并且被认为与PTSD中看到的恐惧和焦虑情感反应的异常有关。