松果体における光情報伝達系の分子メカニズムと転写調節機構

松果体光转导系统的分子机制及转录调控机制

• 批准号: 17770058
• 负责人: 小島 大輔
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17770058/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; オプシン; 光受容; 組織特異性; 突然変異体スクリーニング; 松果体; メラノプシン; G蛋白質

概日時計は地球上のほぼ全ての生物にみられる普遍的な生命現象であり、その分子基盤の解明は現代の生命科学分野における最重要課題のひとつである。本研究では、(1)概日時計の光リセット機構、および(2)中枢時計組織に特異的に機能遺伝子を発現させる転写メカニズムを明らかにするため、松果体を主な研究対象として以下の研究を行った。1.松果体の光情報伝達系の解析:ニワトリ松果体における概日時計の光リセットはG_<11>型の三量体G蛋白質を介すると考えられるが、このG蛋白質を活性化する光受容分子の実体は不明である。本年度は、候補分子メラノプシン(cOpn4-1)に加えて、その重複遺伝子cOpn4-2がニワトリ松果体に発現していることを見出した。そこで、cOpn4-2の組換え蛋白質を培養細胞系において調製し、発色団11-cis-retinalとの再構成実験を行ったところ、可視部に光感受性をもつ色素の生成が確認された。したがってcOpn4-2もcOpn4-1と同様に松果体の光受容分子として機能すると考えられる。また、ゼブラフィッシュの松果体近傍(手綱核)に新規オプシン遺伝子valopbが発現することを確認した。valopb遺伝子産物と発色団との再構成実験を行ったところ、約510nmに吸収極大をもつ光感受性色素の生成を確認した。2.松果体特異的な遺伝子発現に関わる転写因子群の同定:新規シス配列PIPEを介した松果体特異的な転写メカニズムを解明するため、PIPE依存性の松果体GFP発現を示す遺伝子導入ゼブラフィッシュを用いて、優性突然変異体スクリーニングを行っている。本年度は、これまでに単離した変異系統のより詳細な表現型解析を行い、うち2系統においてホモ接合体と考えられる表現型(松果体のGFP発現の消失)を見出した。これにより、変異体の原因遺伝子の同定に向けた重要な足がかりを得た。

The most important topic in modern life science is the understanding of the molecular basis of all living things on earth. This study includes: (1) general chronology of light organs;(2) central chronology of light organs;(3) development of specific functional genes;(4) pineal gland of light organs; and (5) research on the following. 1. Analysis of the pineal photoinformation system: the pineal photoinformation system is based on the time-dependent photoinformation system of the pineal <11>G-type G-protein. This year, the candidate molecule cOpn4-1 was added to the list, and the repeat molecule cOpn4-2 was found in the pineal gland. In addition, the expression of protein in cell culture of Opn4 -2 was also determined by the expression of protein in 11-cis-retinal cells and the formation of pigment in visible cells. A study on the function of photoreceptors in the pineal gland This is a confirmation of the discovery of a new gene valopb near the pineal gland. The reconstruction of valopb gene products and color emitters has been carried out, and the formation of photoreceptive pigments with extremely high absorption at approximately 510nm has been confirmed. 2. Identification of pineal-specific gene expression related factors: new regulation of PIPE and pineal-specific gene expression related factors: interpretation of PIPE dependent pineal GFP expression related factors: introduction of gene expression related factors, optimization of gene expression related factors. This year, the phenotype analysis of different systems was performed in detail, and the phenotype of different systems (GFP expression and disappearance in pineal gland) was observed. The reason for this change is that it is important to have the same direction.

项目成果

多様な新規オプシンの構造と機能

多种新视蛋白的结构和功能

• 发表时间: 2006
• 期刊: 比較生理生化学 23巻・3号
• 作者: 佐々木 謙;朝岡 潔;Ken SASAKI;Ken SASAKI;Ken-ich HARANO;Ken SASAKI;佐々木謙・原野健一・長尾隆司;原野健一・佐々木謙・長尾隆司・佐々木正巳;原野健一・佐々木謙・長尾隆司・佐々木正己;佐々木謙・原野健一・長尾隆司;佐々木 謙;K. Sasaki;小島 大輔
• 通讯作者: 小島 大輔