Struktur und biochemische Charakterisierung des tRNA-Exportin-t-Ran-GTP Komplexes

在真核生物中，Zellen韦尔登将转运RNA（tRNA）引入Zellkern的合成和运输中，其功能是在Zytoplasma的转运韦尔登中进行蛋白质生物合成。Dieser Export wird das tRNA-specizietary he Rezeptorprotein Exportin-t and die GTcaseRan vermittelt.这些生物化学和分子基础过程是未知的，并且是植物生长的基础。含tRNA和RanGTP的转基因植物具有生物化学特性。新的生物化学方法是用荧光标记的tRNA和蛋白质合成的动力学方法。通过对tRNA的前处理、修饰和氨酰化，以及对核质转运的韦尔登，可使其发挥重要作用。体外选择（SELEX）韦尔登法是一种特异性结合RNA-适体的方法，它是研究t/t-RNA输出的基础结构。用SELEX Verfahren韦尔登对tRNA转运进行抑制。这是一个很好的例子，Exportin-t sowohl alleine also im Komplex with tRNA and Ran-GTP for die Röntgenstrukturanalysis zu kristallisieren and die Struktur zu bestimmen。通过对tRNA核浆体转运体的生物化学研究，三维结构的解析变得更加清晰。

In eukaryotischen Zellen werden die transferRNAs (tRNA) im Zellkern synthetisiert und müssen, um ihre Funktion bei der Proteinbiosynthese erfüllen zu können, in das Zytoplasma transportiert werden. Dieser Export wird durch das tRNA-spezifische Rezeptorprotein Exportin-t und die GTPase Ran vermittelt. Die biochemischen und molekularen Grundlagen dieses Prozesses sind weitgehend unbekannt und Gegenstand der geplanten Untersuchungen. Die Wechselwirkungen von Exportin-t mit tRNA und RanGTP wird biochemisch charakterisiert. Neben biochemischen Verfahren sind kinetische Messungen mit fluoreszenz-markierten tRNAs und Protein geplant. Dabei soll der Zusammenhang zwischen der Prozessierung, Modifikation und Aminoacylierung der tRNA und dem nucleozytoplasmatischen Transport untersucht werden. Mittels in vitro Selektion (SELEX) werden Exportin-t bindende RNA-Aptamere isoliert und mit ihrer Hilfe die strukturellen Grundlagen der Exportin-t/t-RNA Wechselwirkung studiert. Spezifische Inhibitoren des tRNA Transportes sollen mit dem SELEX Verfahren entwickelt werden. Es ist geplant, Exportin-t sowohl alleine als auch im Komplex mit tRNA und Ran-GTP für die Röntgenstrukturanalyse zu kristallisieren und die Struktur zu bestimmen. Die Aufklärung der drei-dimensionalen Struktur soll zusammen mit den biochemischen Untersuchungen das Verständnis des nuckleozytoplasmatischen Transportes der tRNA wesentlich vertiefen.