Struktur und biochemische Charakterisierung des tRNA-Exportin-t-Ran-GTP Komplexes

tRNA-exportin-t-Ran-GTP 复合物的结构和生化表征

• 批准号: 5352970
• 负责人: Professor Dr. Mathias Sprinzl (†)
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Biochemie I
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5352970?language=en
• 关键词: Struktur; und; biochemische; Charakterisierung; des

In eukaryotischen Zellen werden die transferRNAs (tRNA) im Zellkern synthetisiert und müssen, um ihre Funktion bei der Proteinbiosynthese erfüllen zu können, in das Zytoplasma transportiert werden. Dieser Export wird durch das tRNA-spezifische Rezeptorprotein Exportin-t und die GTPase Ran vermittelt. Die biochemischen und molekularen Grundlagen dieses Prozesses sind weitgehend unbekannt und Gegenstand der geplanten Untersuchungen. Die Wechselwirkungen von Exportin-t mit tRNA und RanGTP wird biochemisch charakterisiert. Neben biochemischen Verfahren sind kinetische Messungen mit fluoreszenz-markierten tRNAs und Protein geplant. Dabei soll der Zusammenhang zwischen der Prozessierung, Modifikation und Aminoacylierung der tRNA und dem nucleozytoplasmatischen Transport untersucht werden. Mittels in vitro Selektion (SELEX) werden Exportin-t bindende RNA-Aptamere isoliert und mit ihrer Hilfe die strukturellen Grundlagen der Exportin-t/t-RNA Wechselwirkung studiert. Spezifische Inhibitoren des tRNA Transportes sollen mit dem SELEX Verfahren entwickelt werden. Es ist geplant, Exportin-t sowohl alleine als auch im Komplex mit tRNA und Ran-GTP für die Röntgenstrukturanalyse zu kristallisieren und die Struktur zu bestimmen. Die Aufklärung der drei-dimensionalen Struktur soll zusammen mit den biochemischen Untersuchungen das Verständnis des nuckleozytoplasmatischen Transportes der tRNA wesentlich vertiefen.

在真核生物中，Zellkern合成和m<s:1> ssen，以及蛋白质生物合成的功能（protein biosynthesis） erfellenzu können，在Zytoplasma transportitit werden。出口产品包括tRNA-spezifische Rezeptorprotein Export -t和die GTPase Ran vermittelt。生物化学与分子生物学。生物化学与分子生物学进展。生物化学与分子生物学进展。生物化学特性研究[j]。荧光标记trna和蛋白质植物的研究。研究了tRNA和核浆体在转运条件下的修饰和氨基酸基化。体外筛选（SELEX）是一种出口-t -结合rna -适体分离物，并在体外筛选的基础上进行了出口-t/t-RNA的筛选。对tRNA转运蛋白的抑制作用。他的第一个工厂，出口- sowhaline也包括在Komplex mit tRNA和Ran-GTP f<s:1> r die Röntgenstrukturanalyse zu crystallisieren和die Struktur zu beestimmen。Die Aufklärung der dedimensionalen strucktur soll zusammen mit den biochemischen Untersuchungen das Verständnis des nuckleozytoplasmatischen Transportes der tRNA wesentlich vertifen。