Molekulare Grundlagen der Wirkungsweise der Proteinbiosynthese-assoziierten GTPasen

蛋白质生物合成相关 GTP 酶作用模式的分子基础

• 批准号: 5236562
• 负责人: Professor Dr. Mathias Sprinzl (†)
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Biochemie I
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1994-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5236562?language=en
• 关键词: Molekulare; Grundlagen; der; Wirkungsweise; Proteinbiosynthese

Translationsfaktoren spielen eine zentrale Rolle bei der Proteinbiosynthese. Einige dieser Proteine gehören zur Klasse der GTP/GDP bindenden Proteine und kontrollieren den Ablauf, insbesondere die Geschwindigkeit und die Genauigkeit der Translation. In diesem Vorhaben sollen die molekularbiologischen, biochemischen und kristallographischen Vorarbeiten zur Ermittlung der Röntgenstruktur des Initiationsfaktors-1 (IF1), Initiationsfaktors-2 (IF2), des Terminationsfaktors-1(RF1) und des "ribosome recycling factors" (RRF) aus Thermus thermophilus durchgeführt werden. Die entsprechenden rekombinanten Proteine werden in E. coli überproduziert, biochemisch charakterisiert und kristallisiert. Die Wechselwirkungen der Translationsfaktoren mit Ribosomen und anderen Proteinen werden mit Fluoreszenz- und ESR-Spektroskopie sowie Quervernetzungs-Experimenten untersucht. Dazu wird die Methode der gezielten Thiolmarkierung der Proteinoberflächen angewandt. Biochemische Studien werden sich hauptsächlich auf die noch ungelöste Frage der Regulation der GTPase-Reaktion und des Mechanismus des Nukleotidaustausches in verschiedenen Translationsfaktoren konzentrieren. Kinetische und thermodynamische Messungen, NMR-Spektroskopie und gerichtete Mutagenese kommen hier zur Anwendung.

在蛋白质生物合成方面的中心作用。Einige dieser Proteine gehören zur Klasse der GTP/GDP bindenden Proteine and controllieren den Ablauf，insbesondere die Geschwindigkeit und die Genauigkeit der Translation.本文从分子生物学、生物化学和生物化学的角度研究了起始因子-1（IF 1）、起始因子-2（IF 2）、终止因子-1（RF 1）和“核糖体再循环因子”（RRF）在嗜热栖热菌（Thermus thermophilus）韦尔登中的作用。E.大肠杆菌的生产、生化特性和结晶特性。核糖体和蛋白质的翻译产物的Wechselenkungen可通过酶联免疫吸附试验和ESR-Spektroskopie进行。本文介绍了一种蛋白质标记的方法。生物化学研究韦尔登的主要内容是对GTP酶反应的调控和核反应的机制进行进一步的研究。运动学和运动学测量、核磁共振光谱学和遗传突变学可用于诊断。