免疫制御剤サリドマイドに結合する因子群の細胞内における機能解析

与免疫调节剂沙利度胺结合的因子的细胞内功能分析

• 批准号: 06J05754
• 负责人: 伊藤 拓水
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J05754/
• 关键词: サリドマイド; ケミカルバイオロジー; 分子生物学

研究は前年度および研究計画に引き続き実施した。前年度によりTHIR2はタンパク質分解系に関わる酵素複合体を形成し、サリドマイドはregulatorであるRをTHIR2から解離させることにより作用することが判明している。そこで今年度は、この現象がin vivoにおいていかなる意義があるのかを検証するために、ゼブラフィッシュをモデル動物として用いた解析を行った。ゼブラフィッシュを受精後3時間において800uMのサリドマイドを投与したlingerにて薬浴させることにより、ヒトにおける耳の奇形(縮小)を再現することが判明した。そしてTHIR2の遺伝子発現を抑制するモルフォリノアンチセンスオリゴを作成し、ゼブラフィッシュ胚にマイクロインジェクションさせたところ、同様の耳の縮小を検出することに成功した。次に、耳の奇形がTHIR2のみを介しているかどうかを確かめるために、サリドマイド非結合型点変異体の作成を行った。THIR2のC末にサリドマイドが結合することは前年度までの解析により判明していたが、さらに絞り込みを行い、サリドマイド結合能が野生型の1/10-100の点変異体を作成することに成功した。今後、THIR2をノックダウンしたゼブラフィッシュにおいて以上のサリドマイド非結合型点変異体を発現するmRNAを導入することでrescue実験を行い、その上でサリドマイドを薬浴した際に、奇形が生じないかどうかを検証する予定である。またRに対するモルフォリノをゼブラフィッシュに導入した際に、THIR2を抑制した表現型もしくはサリドマイドを薬浴させた表現型と類似しているかを検証することを計画している。

The research plan for the previous year was implemented. In the previous year, THIR2 was found to be involved in the formation of enzyme complexes in the decomposition system. This year, the phenomenon is in vivo, the meaning is in vivo, the animal is in vivo, the analysis is in vivo, the phenomenon is in vivo, the animal is in vivo, the phenomenon is in vivo, the animal is in vivo, the phenomenon is in vivo. 3 hours after fertilization, 800uM of sperm was injected into the body and the shape of the ear was reduced. THIR2 's transmission was successfully suppressed. Second, the ear and the strange shape of THIR2 are made into different shapes. THIR2 is a wild type protein that can be successfully synthesized by analyzing the protein at the end of the first year. In the future, THIR2 gene expression will be detected in the presence of the above non-binding gene, and the gene will be detected in the presence of the above non-binding gene. The expression of THIR2 is similar to that of THIR3.

项目成果

精神遅滞関連因子CRBNはDDB1と共に新規E3ユビキチンリガーゼ複合体を形成する

精神发育迟滞相关因子CRBN与DDB1形成新型E3泛素连接酶复合物

• 发表时间: 2007
• 作者: 伊藤 拓水;堀田 健太郎;石原 聡;半田 宏
• 通讯作者: 半田 宏

A celecoxib derivative potently inhibits proliferation of colon adenocarcinoma cells by induction of apoptosis.

塞来昔布衍生物通过诱导细胞凋亡有效抑制结肠腺癌细胞的增殖。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Anticancer Res. Sep-Oct; 26 (5A)
• 作者: Kusunoki N;Ito T;Sakurai N;Handa H;Kawai S
• 通讯作者: Kawai S