神経細胞死抑制因子ADNFの受容体の同定

神经元细胞死亡抑制剂 ADNF 受体的鉴定

基本信息

批准号：
18790603
负责人：
鈴木宏昌
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790603/
关键词：
神経科学シグナル伝達薬理学脳・神経

项目摘要

既に分離されている神経細胞死抑制因子ADNFの受容体候補物質S1について解析を行った。これまでのところ、S1はADNF結合タンパク質として分離され、さらに、内在性S1を特異的siRNAでノックダウンすると、ADNFが示す変異SOD1誘導性神経細胞死抑制効果がほぼ完全に消失することを明らかにしている。また、S1は他のペプチド性リガンド受容体と異なり、細胞質内に局在することおよびADNFが示す神経細胞死抑制経路にチロシンキナーゼおよびCaMKIVが含まれることがわかっている。S1の発現解析では、S1は組織間でユビキタスに発現していること、またALSモデルマウスとその野生型リタメイトで神経組織における発現量は差のないことがわかった。さらに具体的なシグナル伝達経路について解析を行った。その結果、S1は細胞内Ca濃度を制御するPLCγ1と高発現および内在性レベルで結合することがわかり、また、内在性PLCγ1を特異的siRNAでノックダウンするとADNFの変異SOD1誘導性神経細胞死抑制効果がほぼ完全に消失することがわかった。また、各種阻害剤を用いた検討より、ADNFの細胞死抑制経路に、CaMKKおよびSrcファミリーチロシンキナーゼが含まれることが明らかとなった。以上の現段階の結果を総合すると、ADNFが細胞質内においてS1に結合すると、SrcファミリーチロシンキナーゼおよびPLCγ1が活性化され、PLCγ1によって惹起されたCaがCaMKK、CaMKIVの活性化を導き、最終的な生存シグナルが誘導されると考えられる。今後は、ADNFとS1の結合がどのようにSrcファミリー・チロシンキナーゼおよびPLCγ1を活性化し下流シグナルを導くのか、具体的な神経細胞死抑制効果の活性化メカニズムを引き続き検討して行く。

对神经元细胞死亡抑制剂ADNF的先前分离受体电位S1进行了分析。到目前为止，S1已被分离为ADNF结合蛋白，并且已经表明，用特定的siRNA敲低内源S1几乎完全消除了ADNF的突变体SOD1诱导的神经元死亡抑制作用。此外，与其他肽配体受体不同，S1位于细胞质中，并被发现在ADNF表现出的神经元死亡抑制途径中包含酪氨酸激酶和CAMKIV。 S1的表达分析表明，S1在组织之间普遍表达，并且ALS模型小鼠与其野生型利氏菌之间的神经组织的表达水平没有差异。分析了更具体的信号通路。结果表明，S1与PLCγ1结合，PLCγ1在高表达和内源水平上控制细胞内Ca浓度，并且用特定的siRNA敲低内源性PLCγ1几乎完全消除了ADNF的突变体SOD1诱导的神经元死亡抑制作用。此外，使用各种抑制剂的研究表明，ADNF细胞死亡抑制途径包括CAMKK和SRC家族酪氨酸激酶。总而言之，当ADNF与细胞质中的S1结合时，SRC家族酪氨酸激酶和PLCγ1被激活，并且由PLCγ1诱导CA会导致CAMKK和CAMKIV的激活，从而导致最终存活信号。将来，我们将继续研究神经元死亡抑制作用激活的特定机制，例如ADNF和S1结合如何激活SRC家族酪氨酸激酶和PLCγ1并导致下游信号。