ハンチントン病病態関連遺伝子のゲノムワイドスクリーニング

全基因组筛选与亨廷顿病病理学相关的基因

• 批准号: 18700355
• 负责人: WONG Hon kit
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18700355/
• 关键词: ハンチントン病; ポリグルタミン病; shRNAライブラリー; 凝集体; CAGリピート

ハンチントン病はその原因遺伝子にCAGリピートの伸長が存在し、その転写産物の伸長ポリグルタミンが発症に強く寄与していると考えられている。この伸長ポリグルタミンを含む遺伝子産物は核内に凝集体形成を引き起こし、これが発症に強く関わっているのではないかと考えられている。近年遺伝子発現を特異的に抑制するsiRNAが利用可能となり、shRNAとして細胞への導入が容易になっている。また多くの遺伝子をカバーするshRNAの利用が可能となり、アッセイ系が確立すれば全ゲノムレベルでの遺伝子抑制による凝集体形成に対する影響をスクリーニングすることが可能となっている。本研究では凝集体形成を抑制するshRNAのスクリーニングを行い、凝集体形成に影響する遺伝子を同定することにより、凝集体形成に関与するカスケードの同定を目指す。1)ハンチンチンエクソン1(伸長CAGリピートを含むもの)をGFPと結合した蛋白を発現する系を用いて、この凝集体形成についてshRNAの影響をアッセイする系をArrayScanを用いて確立した。15000クローン(全遺伝子の1/3)をスクリーニングした。2)shRNAライブラリーは市販のものを用い、検討した範囲で遺伝子抑制が十分行われることを確認した。150Q発現細胞の凝集体抑制効果のあるshrNA682クローンを得た。3)これから16Qの発現に影響を与えない322クローンを選択した。4)150Q細胞でスクリーニングで選択した682遣伝子のうち369遺伝子について全長遺伝子の発現ベクターを得たのでこの効果がshRNAと対応するかどうかを検討し、43クローンがshRNAと対応する効果を示すものであることがわかった。5)スクリーニングで得られた遺伝子の機能解析を予定している。

ハ ン チ ン ト ン disease は そ の reason but 伝 child に the CAG リ ピ ー ト の elongation が し, そ の product planning write の elongation ポ リ グ ル タ ミ ン が 発 disease に strong く send し て い る と exam え ら れ て い る. こ の elongation ポ リ グ ル タ ミ ン を contain traces of む 伝 zi chan content は nuclear に condensation within the collective form を lead き こ し, こ れ が 発 disease に strong く masato わ っ て い る の で は な い か と exam え ら れ て い る. In recent years, posthumous 伝 son 発 now を specific に inhibit す る siRNA が may use と な り, shRNA と し て cells へ の import が easy に な っ て い る. ま た more く の heritage 伝 son を カ バ ー す る shRNA の may use が と な り, ア ッ セ が イ department establish す れ ば full ゲ ノ ム レ ベ ル で の heritage 伝 child restrain に よ る coagulation collective form に す seaborne る influence を ス ク リ ー ニ ン グ す る こ と が may と な っ て い る. This study で は coagulation collective form を inhibit す る shRNA の ス ク リ ー ニ ン グ を す い, collective form に influenced る posthumous son 伝 を with fixed す る こ と に よ り, collective form に masato and す る カ ス ケ ー ド の with fixed を refers す. 1) ハ ン チ ン チ ン エ ク ソ ン 1 (elongation the CAG リ ピ ー ト を containing む も の) を GFP と combining し た protein を 発 now す を る department with い て, こ の coagulation collective form に つ い て shRNA の influence を ア ッ セ イ す る department を ArrayScan を with い て establish し た. 15000 ロ ロ ロ た た (whole heritage 伝 sub-伝 1/3)をス リ リ ニ グ グ た た. 2) shRNA ラ イ ブ ラ リ ー は city vendor の も の を い, beg し 検 た van 囲 で heritage 伝 child restrain が ten branches わ れ る こ と を confirm し た. The inhibitory effect of <s:1> coagulation in 150Q cells is ある, shrNA682 ロ, を を and た. 3) こ れ か ら 16 q の 発 に influence を and え な い 322 ク ロ ー ン を sentaku し た. 4) 150 q cells で ス ク リ ー ニ ン グ で sentaku し た 682 sent 伝 son の う ち 369 legacy 伝 son に つ い て span heritage 伝 son の 発 now ベ ク タ ー を have た の で こ の unseen fruit が shRNA と 応 seaborne す る か ど う か を beg し 検, 43 ク ロ ー ン が shRNA と 応 seaborne す る unseen fruit を shown す も の で あ る こ と が わ か っ た. 5) ス ク リ ー ニ ン グ で have ら れ た posthumous son 伝 の function analytical を designated し て い る.

项目成果

BACE1 cleavage mediaes neurite morphology induced by sodium channel beta4 subunit.

BACE1 裂解介导钠通道 β4 亚基诱导的神经突形态。

• 发表时间: 2007
• 作者: 宮崎晴子;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Amiloride and its derivative ameliorate Huntington's disease pathological processes via an ubiquitin proteasome system-dependent mechanism.

阿米洛利及其衍生物通过泛素蛋白酶体系统依赖性机制改善亨廷顿病的病理过程。

• 发表时间: 2007
• 作者: Wong;H. K.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

BACEl modulates filopodia-1ike protrusions induced by sodium channelbeta4 subunit.

BACE1调节由钠通道β4亚基诱导的丝状伪足样突起。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun 361
• 作者: Miyazaki;H.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Chaperone-mediated autophagy as a potential strategy to amelioratepathological processes related to Huntington disease.

伴侣介导的自噬作为改善亨廷顿病相关病理过程的潜在策略。

• 发表时间: 2007
• 作者: Bauer;P. O.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

神経変性疾患の予防・治療剤

神经退行性疾病的预防/治疗剂

• 发表时间: 2007