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凝集阻害ペプチドQBP1の脳内デリバリー法の開発とポリグルタミン病の分子治療

聚集抑制肽QBP1脑内递送方法的开发及多聚谷氨酰胺疾病的分子治疗

基本信息

批准号：
11J08829
负责人：
武内敏秀
金额：
$ 1.02万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J08829/
关键词：
神経変性疾患ポリグルタミン病 QBP1 脳内デリバリー分子治療

项目摘要

近年、神経変性疾患において、原因タンパク質の構造異常とその凝集が神経変性を引き起こすという共通の発症分子メカニズムが提唱され、この凝集過程をターゲットとした創薬開発が有効と考えられている。このストラテジーに則り同定されたペプチドQBP1は、神経変性疾患の一つであるポリグルタミン(PolyQ)病の原因タンパク質に対し、凝集体形成を強く抑制し、細胞毒性を軽減することが明らかとなっている。本研究ではQBP1の低分子化、および血液脳関門(BBB)透過性キャリア分子の探索により、脳内デリバリー可能な新規凝集阻害分子を開発し、PolyQ病治療薬の開発を目指す。平成24年度は、QBP1の低分子化に必要な構造情報を得るため、異常伸長PolyQタンパク質と^<15>N標識QBP1複合体のNMR立体構造解析を行った。^<15>N標識QBP1は、^<15>N標識したチオレドキシン-QBP1融合体として調製し、チオレドキシンを除去することで得た。^<15>N標識QBP1をチオレドキシン-PolyQタンパク質融合体(Thio-Q62)に加えNMR解析を行ったところ、QBP1由来のシグナルが大きく低下したものの、フリーのQBP1と比較してスペクトル変化が観察されなかった。これは、大部分のQBP1がThio-Q62と相互作用し、大きな複合体中に取り込まれていることを示唆する結果と考えられる。現在は、より小さな複合体を形成すると予想されるThio-Q35を用い、複合体中のQBP1の立体構造を解析している。また、BBB透過性キャリア分子の探索においては、前年度に構築した細胞透過性ペプチド(PTD)ライブラリーについて、細胞内移行性、膜傷害性、およびin vitro BBBキットを用いたBBB透過性の評価を行った。その結果、比較的BBB透過性の高いPTDが得られたため、マウスを用いた脳内移行性検定に向けた準備を行っ

In recent years, the cause of neurological disorders is structural abnormalities, aggregation, and neurological disorders. This is the same as QBP1, which is the cause of neurologic disorders (PolyQ), which strongly inhibits aggregate formation and reduces cytotoxicity. This study is aimed at exploring the molecular structure of QBP1 that is low molecular weight, high permeability to the bloodstream barrier (BBB), developing novel aggregation inhibitors, and developing therapeutic agents for polyQ disease. In 2004, the structural information necessary for QBP1 low molecular weight was obtained, and <15>the NMR stereostructure analysis of QBP1 complex was carried out. <15>N identifies QBP1,^<15>N identifies QBP1 fusion,^ <15>N identification QBP1-PolyQ complex fusion (Thio-Q62) was analyzed by NMR. The origin of QBP1 was detected by NMR. Most of the QBP1 and Thio-Q62 interactions were observed in the large complex. Now, the formation of Thio-Q35 complex is expected, and the three-dimensional structure of QBP1 in the complex is analyzed. BBB permeability molecular exploration in the past year, the construction of cell permeability test (PTD), intracellular migration, membrane injury, and in vitro BBB permeability evaluation. Results: BBB transmittance was higher than PTD, and the migration was more stable.