Purification and analysis of a transoription factor, GATA4 complex from adult mouse heart during developing heart failure

心力衰竭过程中来自成年小鼠心脏的转录因子 GATA4 复合物的纯化和分析

• 批准号: 19590842
• 负责人: MORIMOTO Tatsuya
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Department of Clinical Research, National Hospital Organization Kyoto Medical Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19590842/
• 关键词: プロテオミクス; 心筋細胞肥大; 転写因子; p300; GATA4; Cdk9; トランスジェニックマウス; GATA-4

(1)新規p300/GATA結合蛋白の同定GATA4複合体を構成する蛋白を網羅的に解析し、73個の結合蛋白を同定した。この結合蛋白の中には、転写に重要な役割を果たしている蛋白が含まれていた。転写の伸長反応の促進に関与するP-TEFb (positive transcription elongation factor・b)、ATP 依存的にクロマチン構造を変化させ転写を制御するクロマチンリモデリング因子であるSWI/SNF複合体、クロマチン構築因子Chromatin Assembly Factor-1 (CAF-1)などが含まれていた。(2)P-TEFbによるp300/GATA経路活性化のメカニズムの解明73個の結合タンパクの中で、我々はP-TEFbに着目した。P-TEFbはCdk9とCyclin T1のタイマーからなり、RNA polymeraseII を制御することが知られている。GST pull-down アッセイにより、Cdk9はGATA4と、さらにはp300と直接結合した。培養心筋細胞を用いた実験で、Cdk9のキナーゼ阻害薬であるDRBは、フェニレフリン刺激による肥大反応を抑制した。DRBは、フェニレフリン刺激によるp300のリン酸化およびGATA4のアセチル化の増加を抑制した。また、フェニレフリン刺激によってGATA4とCdk9の結合が増加し、Cdk9はGATA4によって肥大反応遺伝子であるANFプロモーター上にリクルートされる事を見出した。さらに、フェニレフリン刺激によるAN遺伝子のプロモーター活性をDRBが抑制する事がわかった。このことより、肥大刺激によるp300/GATA経路の活性にCdk9のキナーゼ活性が必要であることが示された。

(1)The new p300/GATA binding protein was identified as the GATA4 complex. The binding protein was found in the middle of the cell. P-TEFb (positive transcription elongation factor b), ATP-dependent protein structure, SWI/SNF complex, Chromatin Assembly Factor-1 (CAF-1), etc. are all involved in the promotion of elongation. (2) p300/GATA pathway activation in P-TEFb was detected in 73 binding sites. P-TEFb is a cyclin-T1 inhibitor. GST pull-down is a direct combination of GATA4 and Cdk9. Cultured cardiac muscle cells were treated with CDK9 and DRB to inhibit hypertrophic response. DRB inhibits the increase of p300 and GATA4 in response to a white light stimulus. The combination of GATA4 and Cdk9 was increased by the stimulation of GATA4 and Cdk9, and the ANF was increased by the stimulation of GATA4 and Cdk9 In addition, the DRB can inhibit the activity of the AN gene when it is stimulated. The activity of Cdk9 in the p300/GATA pathway is essential.

项目成果

Dose-dependency in pleiotropic effects of atorvastatin

• DOI: 10.1055/s-0031-1278256
• 发表时间: 2007-09-01
• 期刊: INTERNATIONAL JOURNAL OF ANGIOLOGY
• 影响因子: 0.6
• 作者: Fujita, Masatoshi;Morimoto, Tatsuya;Miwa, Kunihisa
• 通讯作者: Miwa, Kunihisa

Synergistic Effects of Granulocyte-colony stimulating factor and Erythropoietin on Left Ventricular Systolic Function in Rat Myocardial Infarction

粒细胞集落刺激因子与促红细胞生成素对心肌梗死大鼠左心室收缩功能的协同作用

• 发表时间: 2008
• 作者: Yoichi Sunagawa;Tatsuya Morimoto;Teruhisa Kawamura;Tomohide Takaya;Hiromichi Wada;Tomoaki Kuwaki;Shigeki Yanagi;Akihiro Sugimoto;Masaki Tsukashita;Akira Marui;Tadashi Ikeda;Akira Shimatsu;Masatoshi Fujita;Tom Kita;Koji Hasegawa
• 通讯作者: Koji Hasegawa

Serum Levels of Oxidized Low-density Lipoprotein Decrease during Successful Smoking Cessation

成功戒烟期间血清氧化低密度脂蛋白水平下降

• 发表时间: 2009
• 作者: Hiromichi Wada;Noriko Satoh;Shuji Kitaoka;Sachiko Terashima;Tatsuya Morimoto;Masatoshi Fujita;Akira Shimatsu;Yuko Takahashi;Koji Hasegawa
• 通讯作者: Koji Hasegawa

Granulocyte-colony stimulating factor and erythropoietin synergistically improve left ventricular systolic function in heart failure after myocardial infarction in rats

粒细胞集落刺激因子与促红细胞生成素协同改善心肌梗死后心力衰竭大鼠左心室收缩功能

• 发表时间: 2008
• 作者: Yoichi Sunagawa;Tatsuya Morimoto;Teruhisa Kawamura;Tomohide Takaya;Hiromichi Wada;Tomoaki Kuwaki;Shigeki Yanagi;Akihiro Sugimoto;Masaki Tsukashita;Akira Mami;Tadashi Ikeda;Akira Shimatsu;Masatoshi Fujita;Tom Kita;Koji Hasegawa
• 通讯作者: Koji Hasegawa

Left ventricular expression of lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1 serves as a biomarker of heart failure in the salt-sensitive Dahl rat model of hypertension

凝集素样氧化低密度脂蛋白受体 1 的左心室表达可作为盐敏感 Dahl 高血压大鼠模型心力衰竭的生物标志物

• 发表时间: 2008
• 作者: Tomohide Takaya;Tatsuva Morimoto. Yoichi Sunagawa;Hiromichi Wada;Teruhisa Kawamura;Akira Shimatsu;Masatoshi Fujita;Yoshiko Fujita;Tatsuya Sawamura;Koji Hasegawa
• 通讯作者: Koji Hasegawa