gp130活性化によって引き起こされた心筋細胞肥大における核内情報伝達機構の解明

阐明gp130激活诱导心肌细胞肥大的核信号转导机制

基本信息

批准号：
09770482
负责人：
長谷川浩二
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

最近白血病抑制因子やカルディオトロフィン-1などの膜蛋白gp130を活性化するサイト力インが心筋細胞肥大を引き起こすことが明らかになってきた。我々はgp130活性化によるβ-ミオシン重鎖遺伝子の発現誘導に必要なシスエレメントを解析した。即ちβ-ミオシン重鎮プロモーターにルシフェラーゼを結合させたプラスミッドを新生児ラット培養心筋細胞にトランスフェクションした。次に白血病抑制因子によりβ-ミオシン重鎖遺伝子の発現を誘導したところ、トランスフェクションしたルシフェラーゼ遺伝子の発現も同様に誘導された。同プロモーター上のGATAエレメントを変異させると基礎レベルの転写は野生型と変化しないが、対照群に対する白血病抑制因子刺激群における転写活性の誘導が著明に抑制されることが判明した。次に心臓に発現しているGATA因子群、GATA-4/5/6の中で、どれが最も重要かを検討した。GATA-4,-5,-6それぞれの発現ベクターをco-transfectionしたところ、GATA-5のみが強力にβ-ミオシン重鎖プロモーターを活性化することが判明した。又、GATA-5が同プロモーターのGATAエレメントに強く結合し、又、白血病抑制因子による刺激により、その発現が著明に亢進することが明らかとなった。以上よりGATA-5が心不全発症の細胞内情報伝達において役割を果たしている可能性が示唆される。

最近，已经揭示了细胞毒性激活膜蛋白GP130（例如白血病抑制剂和心脏营养蛋白1）会导致心肌肥大。我们分析了通过GP130激活诱导β-肌球蛋白重链基因表达所需的顺式元件。也就是说，将含有荧光素酶的质粒转染到培养的新生大鼠心肌细胞中。接下来，通过白血病抑制剂诱导β-肌球蛋白重链基因的表达，并且类似地诱导了转染的荧光素酶基因的表达。启动子上GATA元件的突变不会将基础水平转录变为野生型，但发现对照组中白血病抑制因素刺激组中转录活性的诱导显着抑制了。接下来，我们研究了哪些GATA因素GATA-4/5/6是最重要的。当共转染GATA-4，-5和-6的表达矢量时，发现只有GATA-5强烈激活β-羟基蛋白重链链启动子。还揭示了GATA-5与启动子的GATA元件强烈结合，并且在白血病抑制剂刺激时，其表达显着增加。以上表明，GATA-5在心力衰竭发作中可能在细胞内信号传导中发挥作用。