新規タンパク質shootin1を中心とした軸索伸長を司る基本メカニズムの解析

以新型蛋白shootin1为中心分析控制轴突生长的基本机制

• 批准号: 19700291
• 负责人: 島田 忠之
• 金额: $ 2.38万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19700291/
• 关键词: 神経科学; 発生分化; 細胞骨格; 軸索; 脳・神経; 細胞接着; 細胞内局在制御; 形態形成

Shootin1のリン酸化修飾により、shootin1とL1-CAM、shootin1とアクチン繊維の相互作用がどのように制御されているかを解析する。shootin1とL1-CAM、shootin1とアクチン繊維との相互作用を制御するメカニズムを、shootin1のリン酸化修飾に焦点を絞り解析した。shootin1がリン酸化修飾を受けるアミノ酸残基を、質量分析を用いて明らかにするため、第一に、HEK293T培養細胞にmycタグを付加したshootin1を発現させ、細胞を脱リン酸化酵素の阻害剤であるフォルスコリンで処理し細胞培養液を、抗myc抗体を用いて免疫沈降し、リン酸化されたshootin1を得た。第二に、大腸菌に発現させたshootin1を生成し、in vitroにおいてAキナーゼで処理することで、リン酸化されたshootin1を得た。今後、これらのリン酸化shootin1をトリプシン処理し、質量分析を行うことで、リン酸化修飾を受けるアミノ酸残基を明らかにする。Shootin1ノックアウトマウスを作成する。In vivoにおけるshootin1の機能を解析することを目的とし、shootin1ノックアウトマウスに対し、C57BL/6、129の2系統に対して、戻し交配実験を行っている。現在までにどちらの系統に対しても1回の戻し交配を終えたヘテロノックアウトマウスを得ることができた。

Shootin1, L1-CAM, Shootin1, and Shootin1 interact with each other in order to control the interaction. Shootin1, L1-CAM, Shootin1, Shootin1, Shootin1, Shootin1 was detected by enzyme inhibitor for cell deacidification, and anti-myc antibody was detected by immunoprecipitation, mass analysis, and enzyme inhibitor for HEK293T cell culture. Second, the production of E. coli Shootin 1, in vitro In the future, the acid residues of the acid shootin1 can be detected by the method of mass analysis. Shootin1 In vivo, shootin1 functions are analyzed for the purpose of mating, shootin1 functions are analyzed for the purpose of mating, and C57BL/6 and 129 functions are analyzed for the purpose of mating. Now, we're going to have to go back and mate.

项目成果

Shootinl Transmits Driving Force of F-actin-flow to L1-CAM for Neurite Elongation.

Shootinl 将 F-肌动蛋白流的驱动力传输至 L1-CAM 以实现神经突伸长。

• 发表时间: 2007
• 作者: 安達直樹;沼川忠広;熊丸絵美;伊丹千晶;仙波りつ子;功刀浩;T. Shimada
• 通讯作者: T. Shimada

Shootin1 interacts with actin retrograde flow and L1-CAM to promote axon outgrowth.

• DOI: 10.1083/jcb.200712138
• 发表时间: 2008-06-02
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Shimada T;Toriyama M;Uemura K;Kamiguchi H;Sugiura T;Watanabe N;Inagaki N
• 通讯作者: Inagaki N

Shootinl interacts with actin retrograde flow and L1-CAM to promote axon outgrowth

Shootinl 与肌动蛋白逆行流和 L1-CAM 相互作用促进轴突生长

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Cell. Biol. 181
• 作者: T Matsumoto;et. al.;松本健志;松本健志;T. Shimada
• 通讯作者: T. Shimada

新規タンパク質shootinlは、F-actinの求心的移動とL1-CAMを連結することで神経突起伸長を促進する

新型蛋白射击通过连接 F-肌动蛋白向心运动和 L1-CAM 促进神经突生长

• 发表时间: 2007
• 作者: Kimura;F.;Itami;C.;Ikezoe;K.;Tamura;H.;Fujita;I.;Yanagawa;Y.;Obata;K.;Ohshima;M.;島田 忠之
• 通讯作者: 島田 忠之