発達過程の生殖細胞におけるp51(別名p63)の機能と制御機構の解析

生殖细胞发育过程中p51（又称p63）的功能和调控机制分析

• 批准号: 11J40093
• 负责人: 藤村 維子
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J40093/
• 关键词: 始原生殖細胞; p51/p63; p53関連遺伝子; ES細胞; mouse vasa homolog; アイソフォーム; 分化; p63/p51; p53ファミリー; 分化誘導; 生殖幹細胞

p63は癌抑制遺伝子であるp53ファミリーのメンバーの一つである。p53がほぼ全ての細胞で機能しているのに対しp63は皮膚や四肢などでの組織特異的な機能が知られている。p63には機能の異なる複数のisoformが存在し、皮膚の組織ではこれらisoformのバランスが上皮幹細胞の分化や生死を制御する。p63はマウス胚の生殖細胞にも発生過程早期から選択的に発現していることから、生殖細胞でも一部のisoformが幹細胞で機能し、分化の制御に関与していることも予想されるが詳細は不明である。そこで本研究では、p63 isoformが発達過程の未分化な生殖細胞の分化や生死の制御に及ぼす影響を明らかにすることを目的とした。分化誘導系には、mouse vasa homolog-venus(又はRFP)の蛍光で始原生殖細胞(PGC)の分化をモニターできるES細胞を利用し、Max遺伝子のノックダウンによる後期PGC様細胞(PGCLC)誘導法、EpiLCを介した前期PGCLC誘導法、の2種類を用いた。分化誘導時に、各isoformの過剰発現およびshRNAなどを用いた機能阻害を行い、vasa陽性細胞の形成および分化マーカー遺伝子群の発現を解析した。その結果、いずれの分化誘導法においても仏タイプのp63の発現はPGC形成に抑制的に働くことが示唆され、p63 isoformはPGCLCの分化や増殖を制御する可能性が示された。一方、自然発生的な細胞死および薬剤投与によるDNA損傷により誘導される細胞死についてp63 isoformの影響を解析した結果、p63によるPGCLC細胞死への影響は認められなかった。これらの結果より、p63 isoformは発達過程の生殖細胞でも一部のisoformが幹細胞で機能し、分化や増殖の制御を担っている可能性が示された。

p63 Cancer Suppressor Gene p53 is responsible for all cellular functions, and p63 is responsible for tissue-specific functions in the skin and limbs. p63 has different functions, and multiple isoforms exist. Skin tissues have different functions, such as isoform differentiation and control of epithelial stem cells. p63: Embryo germ cell development process early selection of the development process, germ cell development of a part of the isoform of stem cell function, differentiation of the control of the relationship between the details of the unknown. The aim of this study is to clarify the effects of p63 isoform on the differentiation, life and death of undifferentiated germ cells. The differentiation induction method of mouse vasa homolog-venus(also called RFP) is used to induce the differentiation of embryonic germ cells (PGGC), and the induction method of late PGCLC, EpiLC and early PGCLC is used to induce the differentiation of ES cells. During differentiation, isoform expression and shRNA function inhibition, vasa-positive cell formation and differentiation, The results showed that the differentiation induction method of p63 could inhibit the formation of PGC, and the possibility of p63 isoform inhibiting the differentiation and proliferation of PGCLC. To analyze the effects of DNA damage induced by naturally occurring cell death and p63 isoform on PGCLC cell death, we found that p63 isoform was responsible for DNA damage. These results suggest that p63 isoform may play a role in the development of germ cells, stem cell function, differentiation and reproduction.