p53ファミリーp51/p63遺伝子産物の活性化と細胞応答

p53 家族 p51/p63 基因产物的激活和细胞反应

• 批准号: 13214113
• 负责人: 井川 洋二
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214113/
• 关键词: がん抑制遺伝子; p53; p51; p63; DNA損傷; リン酸化; プロテアソーム; 細胞周期

主として下記の4つの項目で、p51/p63遺伝子産物はp53と異なる制御を受け、異なる機構で細胞増殖抑制に機能することを示す成果が得られた。新しい知見を要約して記述する。1.酵母ツー・ハイブリッド法によるp51/p63遺伝子産物の分子会合に関する検討(1)p51/p63分子は効率よく会合しホモ二量体を形成するが、p51/p63-p53およびp51/p63-p73のヘテロ二量体を形成する可能性はほとんどない。(2)p53と異なり、p51/p63分子のDNA結合領域は、SV40 large T抗原結合能を持たない。(3)p51/p63トランスアクチベーター(TA)型アイソフォームのN末端領域がMDM2と結合する可能性は認められない。2.TA型p51/p63遺伝子産物の安定性制御に関する分子生物学的解析N末端から進行する欠損変異体、N末端領域内Ser残基の変異体を多数作製して検討し、次の事項を明らかにした。(1)N末端60アミノ酸配列が細胞内で迅速に分解される機構と関係する。(2)その領域はTA活性に必須である。(3)プロテアソームにより分解されている。3.P51/p63トランスアクチベーターのDNA損傷による蓄積・活性化と細胞応答の検討TA型p51/p63産物はMDM2と会合しないが、DNA損傷で蓄積する性質を持ち、Ser/Thrリン酸化が関与する。特にp51A/TAp63γはDNA損傷に応答して蓄積し、その際p21^<waf1>発現誘導、G1/S細胞周期停止を誘導するが、p51B/TAp63αは蓄積しても遺伝子発現や細胞周期に大きく影響しない。4.マウス組織でのin situ hybridizationによるp51/p63発現解析種々の器官の上皮を裏打ちする間葉系細胞、骨格筋、皮膚でTA型の発現があり、△型とは発現組織特異性を異にしている。

结果表明，p51/p63基因产物在以下四个主要项目中通过不同的机制受到抑制细胞生长的功能。摘要并描述新发现。 1。通过酵母双杂交方法对p51/p63基因产物的分子缔合研究（1）p51/p63分子有效地相关地形成同型二聚体，但几乎没有可能形成p51/p63-p53和p51/p63-p73的异二聚体。 （2）与p53不同，p51/p63分子的DNA结合区域没有结合SV40大T抗原的能力。 （3）p51/p63反式激活器（TA）类型同工型的N末端区域与MDM2结合。 2。我们准备并研究了许多从N末端区域N末端和SER残基进展的有缺陷的突变体的TA型p51/p63基因产物的稳定性调节的分子生物学分析，并阐明了以下几点。 （1）它与N端60氨基酸序列在细胞内迅速降解的机制有关。 （2）该区域对于TA活动至关重要。 （3）它被蛋白酶体降解。 3。由于DNA损伤和细胞反应而导致p51/p63反式激活剂的积累和激活检查ta型p51/p63产物与MDM2无关，但它具有在DNA损伤中积累的特性，并且涉及Ser/Thr磷酸化。特别是，p51a/tap63γ响应DNA损伤而累积，并诱导p21^<waf1>表达和G1/S细胞周期停滞，但是p51b/tap63α积聚而没有对基因表达或细胞周期产生重大影响。 4。通过在小鼠组织中原位杂交对p51/p63表达的分析。 TA型在各种器官上皮上的间充质细胞，骨骼肌和皮肤中表达，表达组织特异性与type type的表达特异性不同。

项目成果

Shinohara, S., Kayagaki N, Yagita H, Oyaizu N, Ohba M, Kuroki T., Ikawa Y.: "A protective role of PKCepsilon against TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL)-induced apoptosis in glioma cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 284・5. 1162-1167 (2001)

Shinohara, S.、Kayagaki N、Yagita H、Oyaizu N、Ohba M、Kuroki T.、Ikawa Y.：“PKCepsilon 对 TNF 相关凋亡诱导配体 (TRAIL) 诱导的神经胶质瘤细胞凋亡的保护作用”Biochem .生物物理学.Res.Commun. 284・5. (2001)

Miyata, Y., Ikawa, Y., Shibuya, M., Nishida, E.: "Specific association of a set of molecular chaperones including HSP90 and Cdc37 with MOK, a member of the mitogen-activated protein kinase superfamily"J.Biol.Chem.. 276・24. 21841-21848 (2001)

Miyata, Y.、Ikawa, Y.、Shibuya, M.、Nishida, E.：“包括 HSP90 和 Cdc37 在内的一组分子伴侣与 MOK（丝裂原激活蛋白激酶超家族的成员）的特异性关联”J.Biol .化学.. 276・24.

Osada, M., Inaba, R., Shinohara, H., Hagiwara, M., Nakamura, M., Ikawa, Y.: "Regulatory domain of protein stability of human P51/TAP63, a P53 homologue"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 283・5. 1135-1141 (2001)

Osada, M.、Inaba, R.、Shinohara, H.、Hagiwara, M.、Nakamura, M.、Ikawa, Y.：“人 P51/TAP63（P53 同源物）的蛋白质稳定性调节域”Biochem.Biophys。通讯研究.. 283・5. 1135-1141 (2001)

Kojima, T., Ikawa, Y., Katoh, I.: "Analysis of molecular interactions of the p53-family p51(p63) gene products in a yeast two-hybrid system : homotypic and heterotypic interactions and association with p53-regulatory factors"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 2

Kojima, T.、Ikawa, Y.、Katoh, I.：“酵母双杂交系统中 p53 家族 p51(p63) 基因产物的分子相互作用分析：同型和异型相互作用以及与 p53 调节因子的关联

Okada, Y., Osada, M., Kurata, S., Sato, S., Aisaki, K., Kageyama, Y., Kihara, K., Ikawa, Y., Katoh, T: "P53 gene family p51(p63)-encoded, secondary transactivator p51B(TAp63α) occurs without forming an immunoprecipitable complex with MDM2, but responds to

Okada, Y.、Osada, M.、Kurata, S.、Sato, S.、Aisaki, K.、Kageyama, Y.、Kihara, K.、Ikawa, Y.、Katoh, T：“P53 基因家族 p51（ p63) 编码的次级反式激活因子 p51B(TAp63α) 不会与 MDM2 形成免疫沉淀复合物，但会对