多能性細胞を用いた脳外傷麻痺治療についてのモデル研究

多能细胞治疗脑外伤瘫痪的模型研究

• 批准号: 23659698
• 负责人: 水野 勝重
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Ritsumeikan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23659698/
• 关键词: miR302; 脳外傷; 麻痺; 脳機能改善

iPS細胞が作成・発表されて以来、自分の体細胞由来のiPS細胞を用いた再生医療を実現することへの期待が急速に高まっている。iPS細胞は、幹細胞化の鍵となる4つの遺伝子を細胞に導入することで作製されたが、異なる方法で作成することができる人造多能性幹細胞も多数報告されている。本研究では、miR302遺伝子を細胞内に導入することにより、人造多能性幹細胞を作製し、細胞株ごとに作成効率が変るのか、また、得られた人造多能性幹細胞を利用することで、動物モデルの脳外傷生麻痺が回復するのか、その時の効果や効率に差があるのか、また、がん化がおこるのか等を明らかにすることを目的としていた。そのために、まず細胞内でmiR302ファミリー遺伝子を発現させるために必要なオリゴDNAベクターの配列についての検討を行った。同時に、ヒト細胞株を対象として、遺伝子導入の条件検討を行った。一般的には、スクエア波でエレクトロポレーションすることで、ほ乳動物細胞に対して効率よく遺伝子を導入することができると理解されている。本研究でも、ヒトをはじめとするほ乳動物細胞に対してmiR302発言ベクターを効率よく導入することが必要不可欠であるため、スクエア波を発生することが出来る遺伝子導入装置の購入を計画していた。研究計画で購入を予定していた遺伝子導入装置を購入する前に、同じ規格の遺伝子導入装置を用いて予備的検討を行ったところ、条件の最適化にもかかわらず、導入効率は70%程度であり、期待されたほどの効率は得られないことが明らかとなった。これらの結果から、予定していた遺伝子導入装置の購入は延期した。本研究は、実質的な実施期間が4か月程度であった。miR302遺伝子導入ベクターについては設計途中であり、miR302を導入した人造多能性幹細胞を得るまでにはいたらず、残念である。一方で、ほ乳動物細胞に対する遺伝子導入法としてのエレクトロポレーション法には改善の余地があり、新たな装置開発の必要性が明らかとなった。

Since the creation and development of iPS cells, iPS cells have been used for regenerative medicine since they were derived from somatic cells. The key to converting iPS cells into stem cells is the introduction of cells into the stem cells and the production of them. There are many reports on the artificial pluripotent stem cells produced by the different methods. This study is based on the introduction of miR302 into cells and artificial pluripotent stem cells. Cell production, cell line production efficiency, cell line production, artificial pluripotent stem cells Utilize することで, animal モデルの脳traumatized paralysisがrepair するのか, その时のeffectやefficiencyにThe difference is があるのか, また, がん化がおこるのか, etc. を明らかにすることをpurpose としていた.そのために、まずIntracellular でmiR302ファミリー缝子を発appears させるためにNecessaryなオリゴDNAベクターのmatch array についての検question を行った. At the same time, the conditions for the introduction of に, ヒト cell lines, を対 resembles として, and の睝子 are discussed. Ordinary animals The efficiency of the cells is the introduction of the efficiency of the cells into the cells. In this study, the efficiency of the introduction of milk animal cells into miR302 was determined.とがIt is necessary not to owe であるため, スクエア波を発生することが出る伝子 Introduction device の Purchase and plan していた. The research project has not been purchased yet, and the remaining sub-introduction device has not been purchased yet. The same specifications of the remaining sub-introduction device have not been prepared yet.ろ、Optimization of conditionsにもかわらず、Introduction efficiency is about 70%されたほどのefficiencyはgetられないことが明らかとなった. The result of the delay is the result of the purchase, and the purchase of the scheduled insertion device has been postponed. The duration of this study was 4 months. MiR302 has been introduced into artificial pluripotent stem cells and has been designed in the process of being designed. MiR302 has been introduced into artificial pluripotent stem cells and has been successfully introduced. One-way, one-sided mammary animal cell extraction method There is room for improvement in the ョン method and the necessity of opening new equipment is clear.