权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

高感度質量分析法による皮膚疾患バイオマーカーの網羅的探索

使用高灵敏度质谱全面搜索皮肤病生物标志物

基本信息

批准号：
24591628
负责人：
橋本公二
金额：
$ 3.49万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、尋常性乾癬の新たなバイオマーカーを、高感度質量分析法を用いて網羅的に検索し、乾癬の診断、重症度、薬剤の効果判定に用いることである。また同様のストラテジーで湿疹の代表的疾患であるアトピー性皮膚炎においてもバイオマーカー探索を行い、診断、重症度、薬剤の効果判定に有用であることを示す。本年度は書面にて同意の得られた患者さんから血液を3ml採取し、血清分離後凍結保存を行った。同時に尿、汗も回収し(3ml)凍結保存した。対照として健常人のサンプルの収集を開始した。目標症例各疾患50例、正常人50例のうちアトピー性皮膚炎5例、尋常性乾癬2例、正常人12例のサンプルを回収することができた。安定同位体で標識した各疾患特異的ヒトタンパク質ライフブラリーの構築コムギ胚芽インビトロタンパク質合成技術を用いて、同位体標識タンパク質ライブラリーの作成を行った。膜貫通型タンパク質の合成には、リポソームを利用する無細胞タンパク質合成技術を用い、同位体標識タンパク質の作成には、安定同位体で標識したL-アミノ酸リジン(L-Lys-13C615N2)とアルギニン(L-Arg-13C615N4)を使用した。全ての合成タンパク質はTIPsタグにより濃度を500 fmol/μl に補正した後、低吸着マイクロチューブへ分注し、内部標準用試料として-80度で保存・管理を行った。SIRPL基本ライブラリー用合成候補としてインターロイキンおよびその受容体、インターフェロンおよびその受容体、ケモカインおよびその受容体、その他のサイトカインおよびその受容体、造血因子およびその受容体、細胞傷害因子およびその受容体、細胞増殖因子およびその受容体、ADAMメタロプロテアーゼ、MT-MMPおよびMPメタロプロテアーゼとその阻害因子TIMP、オーファン受容体も含む各種GPCR、細胞外マトリックス、がん遺伝子、がん抑制遺伝子など約800種類を目標とし合成を開始している。

The purpose of this study is to explore the application of high-sensitivity mass analysis in the diagnosis, severity and outcome determination of psoriasis vulgaris. The symptoms of eczema are similar to those of eczema, which is useful for diagnosis, severity, and outcome determination. This year, written consent was obtained from the patient, 3ml of blood was taken, and the serum was frozen and stored. At the same time, urine and sweat were recovered (3ml) and frozen. The collection of photos and photos of healthy people began Objective: 50 cases of various diseases, 50 cases of normal people, 5 cases of psoriasis vulgaris, 12 cases of normal people. Stable isotope identification for each disease-specific species and construction of a novel isotope identification system. The synthesis of membrane-penetrating isoforms is based on cell-free isoform synthesis techniques. Isoform identification is based on the synthesis of stable isoforms. L-Arg-13 C615 N4 is used. All synthetic samples are stored at 500 fmol/μl after correction, low absorption, and-80 ℃ for internal standards. SIRPL Basic Profile Profile MT-MMP, MMP,