陳旧性心筋梗塞に対するCardiosphere由来細胞シートの効果

心球源细胞片对陈旧性心肌梗死的作用

基本信息

批准号：
25861230
负责人：
鈴木亮
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25861230/
关键词：
陳旧性心筋梗塞細胞移植療法細胞シート心筋梗塞

项目摘要

陳旧性心筋梗塞を含む心不全に対する細胞移植療法は、心機能回復効果や心筋再生などが期待される方法である。しかし、常時拍動している心臓における生着率は低く、その効果は限定的であり、生着性を上げより高い新機能回復効果を生むアプローチが必要とされる。本研究では、細胞生着性を促進させる手法である細胞シート技術を用いてCardiosphere由来細胞シートを作成し、陳旧性心筋梗塞に対する新たな治療ツールとなり得るかを検証した。本研究ではまず、ヒトおよびマウスから従来法とは異なる独自の方法でCardiosphere由来細胞様の細胞を単離した。本法で単離した細胞がCardiosphere由来細胞であるかの検証を行った結果、単離した細胞は、c-Kit、CD90およびCD105を発現していた。これらのマーカータンパク質はいずれもCardiosphere由来細胞で発現していることから、これらの結果は、申請者が開発した方法により単離した細胞が、従来法と遜色ないほどの単離・精製度を有していることを示している。続いて、温度感受性の細胞シート作製キット（UPCell）を用いてCardiosphere由来細胞シートを世界で初めて作製した。興味深いことに、Cardiosphere由来細胞シートは、血管新生因子VEGFを高産生し、また活性型MMP2ーを産生していた。これらの結果は、Cardiosphere由来細胞シートが移植後の梗塞心において血管新生を促し、さらに線維化部位を消化し得ることを示唆している。本研究では陳旧性心筋梗塞モデル動物への移植実験を行うことはできなかったが、高い血管新生因子産生能、線維化抑制因子の産生、高い細胞生着能、などを考え合わせると、その効果が期待される。

细胞移植疗法的心力衰竭，包括旧的心肌梗塞，是一种预期的方法，具有恢复心脏功能和心肌再生的作用。但是，不断跳动的心脏中的植入率很低，其作用是有限的，这种方法可以增加植入并对新功能恢复产生更高的影响。在这项研究中，我们使用细胞片技术创建了心圈来源的细胞表，这是一种促进细胞植入的方法，并检查了它们是否可以成为旧心肌梗塞的新治疗工具。在这项研究中，我们首先使用与常规方法不同的独特方法分离了从人和小鼠那里分离出人类和小鼠的细胞样细胞。由于验证使用这种方法分离的细胞是心圈来源的细胞，分离的细胞表达了C-KIT，CD90和CD105。由于所有这些标记蛋白均在心圈衍生的细胞中表达，因此这些结果表明，通过申请人开发的方法分离的细胞具有与常规方法相当的分离和纯化程度。接下来，使用对温度敏感的细胞片生产试剂盒（Upcell），在世界上首次准备了心圈衍生的细胞表。有趣的是，心圈衍生的细胞表产生了高产生血管生成因子VEGF的生产，还产生了活跃的MMP2。这些结果表明，心圈衍生的细胞表可以在植入后促进梗死心脏的血管生成，并进一步消化纤维化部位。尽管这项研究无法在较旧的心肌梗塞后建模的动物中进行移植实验，但在考虑产生血管生成因子的高能力，纤维化抑制剂的产生以及植入细胞植入的高能力时，预计它会产生影响。