新生児ヘルペスにおける抗炎症的治療介入に関する基盤研究

新生儿疱疹抗炎治疗干预的基础研究

• 批准号: 25870028
• 负责人: 長森 恒久
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25870028/
• 关键词: 新生児ヘルペス; 単純ヘルペスウイルス; アラキドン酸カスケード; 増幅効率; COX2阻害; 抗ウイルス作用; ProstaglandinI2; cyclipAMP; 抗HSV増幅効果; COX-2阻害; IE遺伝子発現抑制

A)まずアラキドン酸カスケード反応とHSV増幅効率の関係性として，HSV感染細胞にCOX-2阻害作用のあるIndomethacin(:インドメタシン)を培養上清に添加するとdose dependentにウイルス増殖効率が低下した。また，COX下流のプロスタノイドであるProstaglandinE2(PGE2)及びProstaglandinI2アナログであるberaprost(:ベラプロスト)のインドメタシンとの共投与条件では，増幅効率が戻る事がわかった．また，plaque reduction assayでアシクロビルとの共投与でインドメタシンはアシクロビルのIC50を0.23から0.03μg/mlへ減少させた。以上から，『HSVは自身の感染に伴いおこるCOX-2発現とPGE2,PGI2産生を利用して自身の増幅効率を上げ』『COX-2活性を抑制するインドメタシンに抗HSV作用を持つ』事がわかった．B)次にインドメタシンの抗HSV作用のメカニズムを明らかにするため，増幅効率を律速するimmediate early(HSV-IE)発現量の変化を解析した。5μMのインドメタシン投与では0.1μg/mlのアシクロビル添加に比較しても感染後6時間でのIE発現が低下しており，インドメタシンの抗HSV作用はIE発現抑制を介する事がわかった。またPGI2受容体(IP)は1つのサブタイプ，PGE2受容体(EP)は4つのサブタイプ(EP1,EP2,EP3,EP4)を持つが，HSVによるアラキドン酸カスケードの利用がどのサブタイプを介するか評価した。HSV感染細胞の培養上清中にEP1～EP4のantagonistを添加したところ，EP3とEP4で有意差を持ってHSV増幅効率が低下した。以上から，HSVは自身の感染に伴って増加しautocrine/paracrine的に作用するPGI2からIP，及びPGE2からEP4を介し細胞内cAMPの上昇を何らかの形でその増幅効率増加に利用できる事を明らかにした。

a）首先，与蛛网膜酸级联反应和HSV扩增效率有关，当HSV感染的细胞添加了吲哚美辛（：吲哚美辛）（吲哚美辛），该细胞具有COX-2抑制作用，将病毒生长的效率降低至剂量依赖性。此外，发现在Prostaglandine2（PGE2）（PGGE2）的条件下，Cox下游的前列腺素和Beraprost（：Belaprost）（：Belaprost）（：Prostaglandini2类似物）与吲哚美辛返回的放大效率。此外，当使用斑块还原测定法与Acyclovir共同给药时，吲哚美辛将Acyclovir的IC50降低至0.23至0.03μg/ml。从上面可以发现，“ HSV使用与自身感染一起出现的COX-2表达以及PGE2和PGI2产生来提高其自身的扩增效率”，并且对吲哚美辛具有抗HSV效应，从而抑制Cox-2活性。 b）接下来，为了阐明吲哚美辛抗HSV作用的机制，我们分析了限制扩增效率的早期（HSV-IE）表达水平的变化。发现与添加0.1μg/mL acyclovir相比，感染后6小时的5μM吲哚美辛降低了IE表达，并且吲哚美辛的抗HSV效应是通过抑制IE表达介导的。此外，尽管PGI2受体（IP）具有一个亚型和PGE2受体（EP）具有四个亚型（EP1，EP2，EP3，EP4），但我们评估了HSV通过HSV使用蛛网膜酸级联的亚型。当将EP1至EP4的拮抗剂添加到HSV感染细胞的培养上清液中时，HSV扩增效率在EP3和EP4之间显着差异，从而降低了HSV扩增效率。从上面可以看出，HSV可以通过某种方式通过PGI2-IP和PGE2-EP4来提高细胞内cAMP的扩增效率，后者充当自分泌/旁分泌。

项目成果

単純ヘルペスウイルス増幅効率と宿主アラキドン酸カスケードの関連

单纯疱疹病毒扩增效率与宿主花生四烯酸级联的关系

• 发表时间: 2014
• 作者: 湯川裕美;長谷川珠代;蒲原真澄;塩満智子;鶴田来美;湯川 裕美;湯川裕美;長森 恒久
• 通讯作者: 長森 恒久