増殖細胞におけるCdk2の細胞内輸送とp27によるCdk2活性の制御機構の解明

阐明增殖细胞中Cdk2的胞内转运以及p27对Cdk2活性的控制机制

• 批准号: 08F08132
• 负责人: 池田 正明
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08132/
• 关键词: 国際研究者交流; 生化学; サイクリン依存性キナーゼ; 細胞周期; クロマチン; 細胞核; CDK阻害タンパク質; タンパク質; フランス

サイクリン依存性キナーゼ(Cdk)の一つであるCdk2は、細胞周期のG1後期からS期に活性化され、DNA複製に中心的な働きをしている。本研究は、Cdk2の核内における制御機構について新たな知見を得ることを目指している。1.新しい核細胞質分画法の確立従来の核細胞質分画法では、低分子量タンパク質の核外への漏出を防ぐことが出来ないことが判明した。そこで、界面活性剤の種類・濃度、塩濃度、浸透圧等の細胞溶解条件の詳細な検討をおこない、核内低分子量タンパク質の漏出が少ない核細胞質分画法を確立した。この方法は、タンパク質の核と細胞質の分布を解析するための有力な手段となると考えられる。2.クロマチン上でのCdk2活性制御機構の解析昨年度の解析で、クロマチン非結合Cdk2は、非イオン性界面活性剤で容易に抽出されるのに対して、クロマチン結合Cdk2は抽出されないことを見出した。さらに、クロマチン結合Cdk2が、その活性を保ったまま高塩濃度処理により抽出されることを明らかにした。そこで本年度は、核内に局在するクロマチン結合および非結合Cdk2を分離し、Cdk2の活性およびCdk2を制御する因子との相互作用を生化学的に解析した。その結果、クロマチンに結合したCdk2は、サイクリンを含むCdk2制御因子と複合体を形成していることが分かった。以上の結果からクロマチン上においてCdk2が制御を受けていることが示唆された。

Cdk2 is activated in the late G1 and S phases of the cell cycle, and the DNA replication center is activated in the middle. In this study, Cdk2 nuclear control mechanism was studied. 1. The new method of nuclear cytoanalysis was established. The method of nuclear cytoanalysis was used to detect the leakage of low molecular weight cytoplasm. Detailed analysis of cell lysis conditions such as type, concentration, saturation pressure, etc. of interfacial active agent, and determination of nuclear cytoplasmic analysis method for leakage of low molecular weight substance in nucleus This method is a powerful tool for analyzing the distribution of nuclear cytoplasm and cytoplasm. 2. Analysis of Cdk2 activity control mechanism on the surface of Cdk2. Analysis of Cdk2 activity control mechanism on the surface of Cdk2. Analysis of Cdk2 activity control mechanism on the surface of Cdk2. Analysis of Cdk2 activity control mechanism on the surface of Cdk2. The activity of CdK2 in combination with CdK2 was maintained at high concentrations. This year, the interaction between binding and unbound Cdk2, Cdk2 activity and Cdk2 regulation factors in the nuclear system was analyzed biochemically. As a result, Cdk2 is bound to Cdk2 and Cdk2 is bound to Cdk2. The above results show that Cdk2 can be controlled by the user.

项目成果

Association of caspase-8 mutation with chemoresistance to cisplatin in HOC313 head and neck squamous cell carcinoma cells

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2009.10.090
• 发表时间: 2009-12-18
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Liu, Juan;Uematsu, Hiroshi;Ikeda, Masa-Aki
• 通讯作者: Ikeda, Masa-Aki

Effect of Nutlin-3 on p53 resistance in tumor cells lacking the ability tophosphorylate Ser46 on p53

Nutlin-3 对缺乏磷酸化 p53 Ser46 能力的肿瘤细胞 p53 耐药性的影响

• 发表时间: 2010
• 作者: Teng Ma;Shumpei Yamada;Ichwan Solachuddin J.A.;MegumiOstu;Kiyoshi Ohtani;Masa-Aki Ikeda
• 通讯作者: Masa-Aki Ikeda

Chemoresistance of a head and neck squamous cell carcinoma cell line carrying caspase 8 mutation

携带caspase 8突变的头颈鳞状细胞癌细胞系的化疗耐药性

• 发表时间: 2008
• 作者: Juan Liu;Nobuo Tsuchida;Hirosi Uematsu;Masa-Aki Ikeda
• 通讯作者: Masa-Aki Ikeda

Tumor Growth Suppression by the Coactivator p300

• DOI: 10.1016/s1349-0079(08)80025-4
• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Oral Biosciences
• 影响因子: 2.4
• 作者: Tamaki Suganuma;M. Ikeda

Expression of estrogen receptors during postnatal development of the brain

出生后大脑发育过程中雌激素受体的表达

• 发表时间: 2008
• 作者: Ikeda Y;Ikeda MA
• 通讯作者: Ikeda MA