癌抑制に関与するクロマチン転写制御機構と口腔癌における制御異常

染色质转录控制机制参与口腔癌的癌症抑制和失调

• 批准号: 17659575
• 负责人: 池田 正明
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659575/
• 关键词: ARID3; 核マトリクス; p53; 癌抑制遺伝子; クロマチン構造変換; 組織再生; 細胞核; 細胞増殖

組織や細胞の個性や可塑性は、塩基配列の変化を伴わずに遺伝子の発現を活性化したり不活性化したりする後生的修飾(エピジェネティクス)によって決定されている。本研究は、核マトリクス結合タンパク質(ARID3)のノックダウンとDNA脱メチル化剤などを併用することにより、体細胞核を人為的に再プログラミングさせることを目指して研究をおこなった。本年度の実績は以下の通りである。昨年度まで解析で、siRNAを用いたARID3ファミリータンパク質の発現抑制(ノックダウン)によって、核染色によるクロマチン構造の変化が認められること、重要な核内構造の一つであるPML核ボディの機能が著しく抑制されることを見出している。より詳細な解析のため、導入効率に優れたshRNAを発現するアデノウイルスベクターを作成し検討をおこなったが、ARID3の十分なノックダウン効果が得られなかった。原因として、ARID3タンパク質が非常に安定なタンパク質で半減期が長いことが考えられた。体細胞核を人為的に再プログラミングさせるために必要と思われる期間、内在性ARID3の発現を抑制するため、現在、長期間の発現に優れたレンチウイルスベクターに使用するベクターを変更して解析をおこなっている一方、本研究の遂行過程で、癌抑制遺伝子p53の制御におけるARID3の機能について多くの新たな知見を得た。DNA障害で誘導された内在性p53が内在性ARID3と結合することを見出し、p53とARID3がin vitroで直接結合する知見を得た。さらに代表的なp53標的遺伝子の一つであるp21遺伝子プロモーターに存在するARID3結合配列あるいはp53結合配列のどちらに変異を導入してもプロモーターの活性化が著しく低下することを見出した。以上の結果から、ARID3が重要な癌抑制遺伝子の一つであるp53の転写制御において重要な役割を担っていることが明らかとなった。

组织和细胞的人格和可塑性由激活或灭活基因表达的表观遗传学修饰（表观遗传学）确定，而不会改变碱基序列。这项研究的目的是通过使用核基质结合蛋白（ARID3）和DNA脱甲基剂的敲低来对体细胞核进行人工重编程。今年的结果如下：直到去年，分析发现，已经观察到使用siRNAS抑制ARID3家族蛋白的表达（敲低）会导致由于核染色引起的染色质结构的变化，并且PML核体的功能（重要的核结构之一）得到了显着抑制。为了进行更详细的分析，我们创建了一个表达具有出色转导效率的shRNA的腺病毒载体并研究了shRNA，但我们无法获得ARID3的足够敲低效应。原因是ARID3蛋白是一种非常稳定的蛋白质，具有长的半衰期。为了抑制在人为重新编程的体细胞核所必需的内源性ARID3的表达，我们目前正在更改用于长期表达的慢病毒载体的载体，尽管我们在肿瘤抑制Gene P53的过程中获得了有关ARID3的功能的大量知识，但在此研究过程中。我们发现由DNA损伤诱导的内源性p53与内源性ARID3结合，发现p53和arid3直接在体外结合。此外，发现启动子的激活也会显着降低，即使将突变引入了p21基因启动子中存在的ARID3结合序列或p53结合序列，这是代表性靶基因之一。以上结果表明，ARID3在p53的转录调节中起重要作用，p53是重要的肿瘤抑制基因之一。

项目成果

DRIL1 is involved in p53-target gene expression and apoptosis

DRIL1 参与 p53 靶基因表达和细胞凋亡

• 发表时间: 2007
• 作者: Ichwan SJA;Otsu M;Yamada S;Ikeda MA
• 通讯作者: Ikeda MA

Association of expression of receptor for advanced glycation end-products (RAGE) and invasive activity of oral squamous cell carcinoma.

晚期糖基化终产物受体（RAGE）表达与口腔鳞状细胞癌侵袭活性的关联。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Oncology 69
• 作者: Bhawal UK;Ozaki Y;Nishimura M;Sugiyama M;Sasahira T;Nomura Y;Sato F;Fujimoto K;Sasaki N;Ikeda MA;Tsuji K;Kuniyasu H;Kato Y.
• 通讯作者: Kato Y.

Cytoplasmic sequestration of cyclin D1 associated with cell cycle withdrawal of neuroblastoma cells.

细胞周期蛋白 D1 的细胞质隔离与神经母细胞瘤细胞的细胞周期退出相关。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biochem.Biophys.Res.Commun. 340
• 作者: Sumrejkanchanakij P;Eto K;Ikeda MA.
• 通讯作者: Ikeda MA.

Tumor Growth Suppression by the Coactivator p300

• DOI: 10.1016/s1349-0079(08)80025-4
• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Oral Biosciences
• 影响因子: 2.4
• 作者: Tamaki Suganuma;M. Ikeda

Inhibitory effect of CT domain of CCN3/NOV on proliferation and differentiation of osteogenic mesenchymal stem cells, Kusa-A1

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2008.02.010
• 发表时间: 2008-04-11
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Katsuki, Yuko;Sakamoto, Kel;Katsube, Ken-Ichi
• 通讯作者: Katsube, Ken-Ichi