誘導多能性幹(iPS)細胞を用いた神経系細胞の誘導と脊髄損傷治療への応用

利用诱导多能干细胞（iPS）诱导神经系统细胞及其在脊髓损伤治疗中的应用

• 批准号: 08J05766
• 负责人: 三浦 恭子
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J05766/
• 关键词: iPS細胞; 脊髄損傷; 神経幹細胞; 細胞移植; 再生医療; 安全性; 神経分化; iPS; 人工多能性幹細胞

近年、私たちの研究室では、体細胞に数種の遺伝子を導入することにより、ES細胞様の人工多能性幹(induced pluripotent stem : iPS)細胞を作成することに成功した。脊髄損傷の患者本人の体細胞からiPS細胞を作り出し、神経系細胞へと分化誘導して移植することが可能となれば、免疫拒絶反応や倫理的問題がない理想的な細胞移植治療になると考えられる。しかしiPS細胞由来の神経系細胞が、ES細胞由来の神経系細胞と同等の機能性を有しているかはいまだ不明である。また、iPS細胞は遺伝子導入により人工的に初期化された細胞であることから、極めて慎重にiPS細胞由来神経系細胞の安全性の確認を行わなければならない。そこで本研究課題では、マウスiPS細胞由来神経系細胞の機能性および安全性の評価を行った。マウスiPS細胞からニューロスフェア法を用いて神経系細胞の分化誘導を行ったところ、iPS細胞はin vitroで神経系三系統に分化し、iPS細胞由来ニューロンは電気生理学的に機能的であることが明らかとなった。このiPS細胞由来ニューロスフェアを脊髄損傷モデルマウスに移植したところ、ES細胞由来ニューロスフェアを移植した時と同等に、後肢の運動機能の回復が認められた。これらの結果から、iPS細胞由来神経系細胞はES細胞由来神経系細胞と同様の機能性を有すると考えられた。現在、iPS細胞は様々な体細胞から様々な方法により樹立されているが、どのように樹立したiPS細胞が最も分化能力が高く安全であるかは、いまだ不明である。そこで次に、神経系細胞への分化誘導時に、(1)体細胞の由来の違い、(2)c-Myc導入の有無、(3)樹立時の薬剤耐性レポーターによる選択の有無が、iPS細胞の分化能と移植後の安全性に与える影響を検討した。マウスiPS細胞36株からニューロスフェアの分化誘導を行い、NOD/Scidマウス線条体へ移植することにより安全性の評価を行ったところ、iPS細胞の分化能と安全性は、体細胞の由来によって大きく異なるということが明らかとなった。

In recent years, several kinds of laboratory and somatic cells have been successfully introduced into the laboratory and ES cells have been successfully tested by artificial pluripotency (induced pluripotent stem: iPS) cells. In the patients with spinal cord disease, there are some problems in the treatment of spinal cord disease, such as the development of iPS cells, the differentiation of neural cells, the possibility of transplantation, immune rejection, and the ideal treatment of cell transplantation. The origin of the iPS cell, the origin of the ES cell, the same function of the cell has the same function, the cell has the same function. This is the first step in the development of human labor, and the reason for the origin of the iPS cell is to confirm the safety of the cell. In this study, the origin of iPS cells is due to the mechanism of cell function, safety and safety. The iPS cell differentiation method is used to direct the differentiation of the three systems of the iPS cell, the in vitro cell, and the iPS cell. The mechanism of computer physiology is known to be sensitive. The origin of the iPS cell is similar to that of the spinal cord, the spine, the spine, the transplant, the ES, the same time of the transplant, and the mechanical response of the hindlimb. The results show that the origin of the iPS cell is the origin of the cell ES cell is the same as the function of the cell. At present, the methods of iPS cell differentiation, cell differentiation, and cell differentiation. The second cycle, the differentiation lead time, (1) the origin of somatic cell differentiation, (2) the introduction of c-Myc, (3) whether there is no one, and the safety of iPS cell differentiation is significantly different from that after transplantation. Thirty-six strains of iPS cells were divided into three groups: cell differentiation guide, NOD/Scid cell transplantation, safety cell differentiation, iPS cell differentiation, somatic cell differentiation, and cell differentiation.

项目成果

Method for selecting secondary neurosphere derived from differentiated cell-derived pluripotent stem cell, clone selected by the method and use of the clone

用于选择来自分化细胞来源的多能干细胞的次级神经球的方法、通过该方法选择的克隆以及该克隆的用途

• 发表时间: 2009

Method of Selecting Secondary Neurospheres Derived from iPS Cells, Clone Selected by the Method and Use of the Selected Clone

选择源自iPS细胞的次级神经球的方法、通过该方法选择的克隆以及所选择的克隆的用途

• 发表时间: 2008

Directed neural differentiation of induced pluripotent stem cells

诱导多能干细胞的定向神经分化

• 发表时间: 2008
• 作者: 楊井伸浩;門脇優;植村卓史;大場正昭;北川進;J. Noaki;H. Ohki;F. Bernardoni;似田貝香門・吉原直樹・町村敬志・林真人;卯田宗平;卯田宗平;卯田宗平;卯田宗平;宇都宮めぐみ;宇都宮めぐみ;宇都宮めぐみ;三浦恭子
• 通讯作者: 三浦恭子