Transfection of Kir6. 2 channel genes into native vascular smooth muscle using sonoporation

Kir6 的转染。

• 批准号: 20300178
• 负责人: TERAMOTO Noriyoshi
• 金额: $ 12.73万
• 依托单位: Saga University (2010)Kyushu University (2008-2009)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20300178/
• 关键词: 分子薬理学; 電気生理学; 分子生物学; DDS; ナノ医工学; ナノバイオ; 生体生命情報; 遺伝子; イオンチャネル; 遺伝子治療; ソノポレーション

The combination of ultrasound and nano-bubbles coated with lipid bilayers(i. e. hybrid nano-bubbles) induces transient membrane permeability, leading to direct delivery of exogenous molecules(such as plasmid, siRNA, anticancer drugs etc.) into cells with minimal invasion. This method is generally termed as to be a sonoporation technique. When Kir6. 2(inwardly-rectifying K^+ channel family 6 subtype 2) genes have transfected into native vascular smooth muscle layers of mouse aorta by use of sonoporation, RT-PCR analysis revealed the expression of Kir6. 2 transcripts in vascular smooth muscle. When Kir6. 2 genes, tagging with Myc-genes, were transfected into native smooth muscle layers using sonoporation, immunohistochemical studies have revealed that Kir6. 2 and Myc proteins were co-expressed in vascular smooth muscle cells. The phenylephrine-induced contraction of mouse aorta was significantly reduced after the treatment of Kir6. 2 gene-sonoporation, hyperpolaring the membrane potentials of vascular smooth muscle.These results suggest that Kir6. 2 genes were functionally expressed in mouse vascular smooth muscles, causing a vascular relaxation due to the activity of Kir6. 2. Thus, we have succeeded to establish the novel gene-transfected method.

超声和脂质双层（即，e.杂交纳米气泡）诱导瞬时膜渗透性，导致外源分子（如质粒、siRNA、抗癌药物等）的直接递送。以最小的侵袭转移到细胞中。该方法通常被称为声致穿孔技术。当Kir 6.利用声致孔法将内向整流钾离子通道家族6亚型2（inwardly-rectified K^+ channelfamily 6 subtype 2）基因转染小鼠主动脉平滑肌细胞，RT-PCR分析显示Kir 6基因表达。2血管平滑肌中的转录本。当Kir 6. 2基因，标记Myc基因，转染到天然平滑肌层，使用声孔，免疫组织化学研究表明，Kir 6。2和Myc蛋白在血管平滑肌细胞中共表达。Kir 6处理后，苯肾上腺素引起的小鼠主动脉收缩显著减少。结果表明，Kir 6。2个基因在小鼠血管平滑肌中功能性表达，由于Kir 6的活性而引起血管松弛。2.因此，我们成功地建立了新的基因转染方法。

项目成果

Noradrenaline

去甲肾上腺素

• 发表时间: 2009
• 作者: Wassall RD;Teramoto N
• 通讯作者: Teramoto N

ナノバブルと超音波を用いたK^+チャネル遺伝子導入による末梢循環障害に対する新規治療法の開発

利用纳米气泡和超声波导入K^+通道基因，开发外周循环障碍的新治疗方法

• 发表时间: 2010
• 作者: 岩佐憲臣;寺本憲功;他
• 通讯作者: 他

High sparial resolution studies of muscarinic neuroeffector junctions in mouse isolated vas deferens.

小鼠离体输精管毒蕈碱神经效应器连接的高空间分辨率研究。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Neuroscience 162
• 作者: Cuprian-Beltechi;et al.
• 通讯作者: et al.

Transfection of Kir6.2 channel genes into native vascular smooth muscle using sonoporation.

使用声孔将 Kir6.2 通道基因转染到天然血管平滑肌中。

• 发表时间: 2010
• 作者: Iwasa;et al.
• 通讯作者: et al.

ソノポレーション法とチャネル遺伝子を用いた末梢循環障害の新規治療法の確立

利用声孔法和通道基因建立外周循环障碍的新治疗方法

• 发表时间: 2010
• 作者: 寺本憲功;久留和成
• 通讯作者: 久留和成