細胞防御機能に連関する塩素イオンチャネルの電気生理学的および分子生物学的研究

与细胞防御功能相关的氯离子通道的电生理和分子生物学研究

基本信息

  • 批准号:
    07770027
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.51万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、ウサギ胃酸分泌細胞の基底側膜に存在する塩基イオンチャネル(C1^-チャネル)のプロスタグランジンE_2(PGE_2)による活性化機構の全容を解明すること、及びこのC1^-チャネルと細胞防御機構との機能的連関性を検討することを目的とした。本研究により、以下のような数々の興味深い新知見を得ることができた。1.PGE_2によるC1^-チャネルの活性化機構の全容の解明……パッチクランプ法、顕微蛍光Ca^<2+>測定法、酸素免疫学的手法を組み合わせた実験から、PGE_2によるC1^-チャネルの活性化に関与する細胞内メッセンジャーは、Ca^<2+>と一酸化窒素(NO)とcGMPであることがわかり、細胞内Ca^<2+>濃度の上昇が、NO産生を刺激し、それに続きcGMPの産生が増大しC1^-チャネルが活性化されるものと考えられた。PGEリセプターのサブタイプに対してEP_3アゴニスト/EP_1アンタゴニストとして働くONO-NT-012は、細胞内Ca^<2+>濃度を上昇させ、C1^-チャネルを活性化した。また、百日咳毒素(PTX)で細胞を前処理しておくと、PGE_2の効果は完全に抑制された。したがってこの機構には、EP_3リセプターが関与しており、PTX感受性のGTP結合蛋白質がEP_3リセプターにカップルしているものと考えられた。2.C1^-チャネルと細胞防御機構との機能的連関……胃酸分泌細胞のエタノールによる障害の程度を、予め細胞内にロードした蛍光色素(BCECF)の漏れの量を測定することにより定量化した。胃酸分泌細胞をNO発生剤のニトロプルシッドやcGMPアナログのdibutyryl cGMPで前処理しておくと、エタノールによる障害は有意に軽減された。このcGMPの細胞防御効果は、C1^-チャネル阻害剤(NPPB)の存在化では観察されなかった。以上のことからC1^-チャネルの活性化が細胞防御機構に深く関与していることが示唆された。
This study で は, ウ サ ギ gastric acid secretion cells の basement membrane に is す る salt base イ オ ン チ ャ ネ ル (C1 ^ - チ ャ ネ ル) の プ ロ ス タ グ ラ ン ジ ン E_2 (PGE_2) に よ る activeness institutions の full capacity を interpret す る こ と and び こ の C1 ^ - チ ャ ネ ル と cell defense agency と の function even masato sexual を beg す 検 る こ と を purpose Youdaoplaceholder0 た. In this study, によ によ and the following <s:1> ような numbers 々 are of great interest. New insights are found in を る とがで とがで た た た. 1.PGE_2によるC1^-チャネ チャネ <s:1> explanation of the activated structure of <s:1>... パ ッ チ ク ラ ン プ method, micro 顕 蛍 light Ca ^ 2 + < > measurement, acid, immunological methods を group み わ せ た be 験 か ら, PGE_2 に よ る C1 ^ - チ ャ ネ ル の activeness に masato and す る intracellular メ ッ セ ン ジ ャ ー は, Ca ^ 2 + > < と a acidification smothering element (NO) と cGMP で あ る こ と が わ か り, intracellular Ca ^ < 2 + concentration > の rise が, NO create し を stimuli, そ れ に 続 き cGMP の が raised effect し C1 ^ - チ ャ ネ ル が activeness さ れ る も の と exam え ら れ た. PGE リ セ プ タ ー の サ ブ タ イ プ に し seaborne て EP_3 ア ゴ ニ ス ト / EP_1 ア ン タ ゴ ニ ス ト と し て 働 く ONO - NT - 012 は, intracellular Ca ^ 2 + < > concentration rising を さ せ, C1 ^ - チ ャ ネ ル を activeness し た. Youdaoplaceholder0, pertussis toxin (PTX)で cell を pretreatment <s:1> ておくと, the effect of PGE_2 <s:1> complete に inhibition された. し た が っ て こ の institutions に は, EP_3 リ セ プ タ ー が masato and し て お り, PTX susceptibility の GTP binding protein made が EP_3 リ セ プ タ ー に カ ッ プ ル し て い る も の と exam え ら れ た. 2.C1^-チャネ と と the connection between the functions of cellular defense mechanisms と チャネ... Gastric acid secretion cells の エ タ ノ ー ル に よ る handicap of を の, to め intracellular に ロ ー ド し た 蛍 pigment (BCECF) light leaking の れ を の quantity determination す る こ と に よ り quantitative し た. Gastric acid secretion cells を NO 発 raw tonic の ニ ト ロ プ ル シ ッ ド や cGMP ア ナ ロ グ の dibutyryl cGMP で 処 before Richard し て お く と, エ タ ノ ー ル に よ る handicap of は intentionally に 軽 minus さ れ た. The inhibitory effect of <s:1> <s:1> cGMP <e:1> on cell defense で and the presence of C1^-チャネ <s:1> inhibitor (NPPB) <e:1> で 観 observe されな されな った った. Above の こ と か ら C1 ^ - チ ャ ネ ル の activeness が cell defense agency に deep く masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hideki Sakai: "Eicosanoid-mediated C1^- secretion induced by the anitumor drug,irinotecan(CPT-11), in the rat colon" Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 351. 309-314 (1995)
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  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hideki Sakai: "GTP-binding protein-mediated production of superoxide anion in rabbit gastric parietal cells" Japanese Journal of Physiology. 45. 673-679 (1995)
Hideki Sakai:“GTP 结合蛋白介导的兔胃壁细胞中超氧阴离子的产生”日本生理学杂志。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hideki Sakai: "Ca^<2+>-activated outward-rectifier K^+ channels and histamine release by rat gastric enterochromaffin-like cells" European Journal of Pharmacology. 291. 153-158 (1995)
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  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Hideki Sakai: "A gastric housekeeping C1^- channel activated via prostaglandin EP_3 receptor-mediated Ca^<2+>/nitric oxide/cGMP pathway" Journal of Biological Chemistry. 270. 18781-18785 (1995)
Hideki Sakai:“胃管家C1^-通道通过前列腺素EP_3受体介导的Ca^2/一氧化氮/cGMP途径激活”《生物化学杂志》。
  • DOI:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
酒井秀紀: "クロライドチャネル" GTP結合蛋白質(実験医学増刊). 14(2)巻. 95-96 (1996)
Hideki Sakai:“氯通道”GTP 结合蛋白(实验医学特别版)14(2)卷 95-96(1996)。
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    2007
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  • 作者:
    Kobayashi S.;et. al.;酒井 秀紀;Asano S. et al.;Fujii T. et al.;Sakai H. et al.;Tabuchi Y. et al.;Tabuchi Y. et al.;酒井 秀紀;森井 孫俊;酒井 秀紀;藤井 拓人;高橋 佑司;高橋 佑司;藤井 拓人;山内 理嗣
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