細胞防御機能に連関する塩素イオンチャネルの電気生理学的および分子生物学的研究

与细胞防御功能相关的氯离子通道的电生理和分子生物学研究

• 批准号: 07770027
• 负责人: 酒井 秀紀
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770027/
• 关键词: パッチクランプ法; ウサギ; 胃酸分泌細胞; 細胞防御機構; イオンチャネル; プロスタグランジン; GTP結合蛋白質

本研究では、ウサギ胃酸分泌細胞の基底側膜に存在する塩基イオンチャネル(C1^-チャネル)のプロスタグランジンE_2(PGE_2)による活性化機構の全容を解明すること、及びこのC1^-チャネルと細胞防御機構との機能的連関性を検討することを目的とした。本研究により、以下のような数々の興味深い新知見を得ることができた。1.PGE_2によるC1^-チャネルの活性化機構の全容の解明……パッチクランプ法、顕微蛍光Ca^<2+>測定法、酸素免疫学的手法を組み合わせた実験から、PGE_2によるC1^-チャネルの活性化に関与する細胞内メッセンジャーは、Ca^<2+>と一酸化窒素(NO)とcGMPであることがわかり、細胞内Ca^<2+>濃度の上昇が、NO産生を刺激し、それに続きcGMPの産生が増大しC1^-チャネルが活性化されるものと考えられた。PGEリセプターのサブタイプに対してEP_3アゴニスト/EP_1アンタゴニストとして働くONO-NT-012は、細胞内Ca^<2+>濃度を上昇させ、C1^-チャネルを活性化した。また、百日咳毒素(PTX)で細胞を前処理しておくと、PGE_2の効果は完全に抑制された。したがってこの機構には、EP_3リセプターが関与しており、PTX感受性のGTP結合蛋白質がEP_3リセプターにカップルしているものと考えられた。2.C1^-チャネルと細胞防御機構との機能的連関……胃酸分泌細胞のエタノールによる障害の程度を、予め細胞内にロードした蛍光色素(BCECF)の漏れの量を測定することにより定量化した。胃酸分泌細胞をNO発生剤のニトロプルシッドやcGMPアナログのdibutyryl cGMPで前処理しておくと、エタノールによる障害は有意に軽減された。このcGMPの細胞防御効果は、C1^-チャネル阻害剤(NPPB)の存在化では観察されなかった。以上のことからC1^-チャネルの活性化が細胞防御機構に深く関与していることが示唆された。

The purpose of this study is to investigate the relationship between the cellular defense mechanism and the function of the activated mechanism in the basal membrane of gastric acid-secreting cells (PGE2). This study is based on a number of interesting new insights. 1. The complete content of the activated mechanism of PGE_2-C1-C1-C2-C1-C2-C1-C1-C The production of cGMP increased in the first half of 2010. PGE is activated by increasing the intracellular Ca^<2+> concentration of ONO-NT-012 and increasing the C1^-cell growth rate. The effects of PTX and PGE_2 were completely inhibited by pretreatment. TX-sensitive GTP binding protein is a protein that binds to the EP_3 receptor. 2. The relationship between the function of C1-C1 NO production by gastric acid-secreting cells is intentionally reduced by the pretreatment of dibutyryl cGMP and the inhibition of NO production by gastric acid-secreting cells. The cellular defense effect of cGMP is detected by the existence of C1-C1-C2-C1-C1-C1- The activation of cell defense mechanisms is closely related to the above.

项目成果

Hideki Sakai: "Eicosanoid-mediated C1^- secretion induced by the anitumor drug,irinotecan(CPT-11), in the rat colon" Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 351. 309-314 (1995)

Hideki Sakai：“抗肿瘤药物伊立替康 (CPT-11) 在大鼠结肠中诱导类花生酸介导的 C1^- 分泌”Naunyn-Schmiedeberg 的药理学档案。

Hideki Sakai: "GTP-binding protein-mediated production of superoxide anion in rabbit gastric parietal cells" Japanese Journal of Physiology. 45. 673-679 (1995)

Hideki Sakai：“GTP 结合蛋白介导的兔胃壁细胞中超氧阴离子的产生”日本生理学杂志。

Hideki Sakai: "Ca^<2+>-activated outward-rectifier K^+ channels and histamine release by rat gastric enterochromaffin-like cells" European Journal of Pharmacology. 291. 153-158 (1995)

Hideki Sakai：“Ca ^ 2 -激活的外向整流K ^ 通道和大鼠胃肠嗜铬样细胞释放组胺”欧洲药理学杂志。

Hideki Sakai: "A gastric housekeeping C1^- channel activated via prostaglandin EP_3 receptor-mediated Ca^<2+>/nitric oxide/cGMP pathway" Journal of Biological Chemistry. 270. 18781-18785 (1995)

Hideki Sakai：“胃管家C1^-通道通过前列腺素EP_3受体介导的Ca^2/一氧化氮/cGMP途径激活”《生物化学杂志》。

酒井秀紀: "クロライドチャネル" GTP結合蛋白質(実験医学増刊). 14(2)巻. 95-96 (1996)

Hideki Sakai：“氯通道”GTP 结合蛋白（实验医学特别版）14（2）卷 95-96（1996）。