Molekulare und funktionelle Analyse ausgewählter Komponenten des centrosomalen Proteoms von Dictyostelium discoideum

Das Centrosom ist der Gröçte isolierbare ProteinkComplex einer真核复合蛋白Zelle Mit einer Zellzyklus-ABHängien Zusammensetzung Aus bis zu 100 verschiedenen Proteinen.[中英文摘要][晓雨-0920交稿]在细胞分裂的情况下，Zell器官和细胞骨架被认为是由蛋白质组成的。从中央到大辞典都是如此，这是一种新的管理模式。DAS ZIELL DES BEANTRANCEN PREJEKTES ES，DUCH蛋白质化学特性和功能基本分析von möglichst vielen neuen neuen Proteinkomponenten des DictyostelialCentrosom ein Besseres Verständennis für Dieses Funktionell Hoch konservierte Zellganell zu gewinnen.Dazu soll von den Proteinen isolierter CentroSomen，nach凝胶营养物质bzw.柱层析师Auftrennung，麻省理工学院现代质量分析师Methoden eine möglichst umfassendeäbersicht der Proteinzusammensetzung des Centrosom erhalten.同时，我们还发现了两种不同的生物特征：一种是细胞的特征，另一种是细胞的特征。这是一种新型的蛋白质和蛋白质融合技术，可用于蛋白质和蛋白质融合。维埃弗斯普雷希恩德Kandidaten Sollen anschlieüend duch Herstellung von“Lost-of-Function”-Dictyostelials-Mutanten Sowie Dowch De Suche nach Interakationsn Partnern weeter untersuthden。

Das Centrosom ist der größte isolierbare Proteinkomplex einer eukaryotischen Zelle mit einer Zellzyklus-abhängigen Zusammensetzung aus bis zu 100 verschiedenen Proteinen. Die Erforschung der Funktionen dieses Zellorgans bei der Organisation des Mikrotubuli-Cytoskeletts oder der Cytokinese setzt eine genaue Kenntnis und Charakterisierung seiner Proteinkomponenten voraus. Als Untersuchungsobjekt dient uns das Centrosom von Dictyostelium-Amöben, das aufgrund unserer Vorarbeiten der letzten Jahre ein etabliertes Modellsystem ist. Das Ziel des beantragten Projektes ist es, durch proteinchemische Charakterisierung und funktionelle Basisanalyse von möglichst vielen neuen Proteinkomponenten des Dictyostelium Centrosoms ein besseres Verständnis für dieses funktionell hoch konservierte Zellorganell zu gewinnen. Dazu soll von den Proteinen isolierter Centrosomen, nach gelelektrophoretischer bzw. chromatographischer Auftrennung, mit Hilfe modernster massenspektrometrischer Methoden eine möglichst umfassende Übersicht der Proteinzusammensetzung des Centrosoms erhalten werden. Parallel dazu soll eine Auswahl der neu identifizierten Centrosomkomponenten zellbiologisch und funktionell charakterisiert werden. Dies soll zunächst durch die subzelluläre Lokalisation der entsprechenden Proteine mit Hilfe von GFP-Fusionsproteinen bzw. spezifischer Antikörper gegen das rekombinante Protein erfolgen. Vielversprechende Kandidaten sollen anschließend durch Herstellung von "loss-of-function"-Dictyostelium-Mutanten sowie durch die Suche nach Interaktionspartnern weiter untersucht werden.