ヒトES細胞を用いた新しい心筋細胞分化制御技術による医用細胞材料の開発

利用利用人ES细胞的新型心肌细胞分化控制技术开发医用细胞材料

• 批准号: 20790525
• 负责人: 平岡 美奈
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20790525/
• 关键词: 再生医学; 発生・分化; 胚性幹細胞

<研究の全体構想及び目的>胚性幹細胞(Embryonic stem cell,ES細胞)は、体内の全種類の細胞に分化することが出来る細胞株である。申請者らはこれまでにマウスES細胞を用いて蓄積した細胞分化及び遺伝子発現制御に関する経験と知見を活かし、ヒトES細胞へと発展的に応用することによって、実用的な心筋・心血管系細胞の医用心筋細胞材料の開発を目指している。<H20年度の研究成果>1)ヒトES細胞から心筋・心血管系細胞への系統的分化誘導技術の構築ヒトES細胞およびマウスiPS細胞を用いてin vitroで分化誘導することに成功した。2)RNAi技術による遺伝子発現抑制実験系の構築(loss-of-function system)タモキシフェンの添加によりES細胞の任意の分化段階においてshRNAを発現し、標的遺伝子の発現を阻害することのできるES細胞対応のshRNA発現システムを構築した。3)薬剤誘導性の遺伝子過剰発現実験系の構築(gain-of-function system)テトラサイクリン誘導性にcDNA発現を誘導できる(Tet-OFF)ES細胞システムを構築した。4)特定部位への遺伝子導入方法の確立ES細胞では、分化誘導中に導入した遺伝子の発現が抑制されるという問題がある。そこで分化後もサイレンシングされにくいDNA領域に、効率よく遺伝子が導入できる実験系を確立した。

Embryonic stem cells (ES cells) differentiate into cell lines from all cell types in vivo. The applicant is interested in the development of cardiac and cardiovascular cell materials for medical use. <H20 research results>1) ES cell differentiation induction technology for cardiac muscle and cardiovascular cell systems was successfully constructed and ES cells and iPS cells were successfully induced in vitro. 2) Construction of a loss-of-function system for inhibiting gene expression in ES cells by RNAi technology. 3) Tet-OFF construction of ES cell system for induction of inducible cDNA expression. 4)The establishment of gene transfer method for specific sites in ES cells and the inhibition of gene transfer in differentiation induction After the differentiation, the DNA domain was established, and the gene was introduced.