異常に長い繰り返し配列のDNA上に金属イオンを解して自己集積する分子の開発

开发通过金属离子在异常长的重复 DNA 序列上自组装的分子

• 批准号: 20659003
• 负责人: 佐々木 茂貴
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659003/
• 关键词: 繰り返しDNA配列; ヘキスト; マイナーグループ結合; 金属錯体; 協奏的結合; マイナーグルーブ結合

目的:遺伝子異常のなかで、異常に長い繰り返しDNA配列が関連している疾患が知られており、対応が困難な遺伝子標的として残されている。本研究では、DNA結合部位と金属結合部位を併せ持つリガンドを用いて金属を介して自己集積させることによって、繰り返しDNA配列の認識を目指す。結果:マグネシウムイオンとの錯体形成を介して、繰り返し配列のDNA上に集積することを期待し、アントラセノン骨格を基本に新たな錯体形成部位としてジオール基を含む新しいリガンドを設計した。平成21年度は、アントラセノン骨格に結合しているアルキル鎖がエチル基(Et-ligand)、ブチル基(Bu-ligand)およびヘキシル基(Hx-ligand)のものを合成し、ジオール基はトリエチレングリコールの末端に導入した。(1) メタノール中でのMg(II)との錯体形成定数(Ks)を求めたところ、リガンド:Mg(ID=2:1錯体を形成し、Ks=8.2 x10^2(ET-ligand), Ks=3.1 x10^3(Bu-ligand), Ks=3.8 x10^3(Hx-ligand)、であった。リガンドの水溶性を考慮するとアルキル鎖はブチル基が相応しいものと判断された。(2) ESI-MSにより錯体形成における金属の選択性とリガンド金属比を求めたところ、Mg(II)に対して選択的に2量体が形成されることが分かった。またCo(II)共存下では多量体の形成が示唆されたが、錯体の明確な成分比は求めることができなかった。(3) 2本鎖DNAとの結合をエチジウムブロマイド競合実験により評価したところ、ブチル体リガンドとヘキシル体リガンドがほぼ同程度の錯体形成能を示すことがわかった。以上の検討から、ジオール部分は付加的な錯体形成部位として作用していることを確認することができなかったが、DNAへの錯体形成においてはアルキル鎖の長さはブチル基が適当であることが分かった。

Purpose: There is a correlation between the abnormality of the deceased's body and the abnormality of the DNA arrangement.いるDisease がknow られており, 対応がdifficulty な伝子名 として成されている. In this study, the DNA-binding site and the metal-binding site were held together with metal.させることによってとによって, 缲り回しDNA Alignment のcognition を目之す. Result: マグネシウムイオンとの Mismatch formation をmediated して, 粲り回しalignment のDNA on the にintegration することをLooking forward to し,アントラセノンをBasic に新たなMicro-body formation part としてジオールbased をむ新しいリガンドをDesign した. Heisei 21 Et-ligand, Et-ligand, Bu-lig and)およびヘキシル基(Hx-ligand)のものを合成し、ジオール基はトリエチレングリコールの末端に導入した。 (1) メタノール中でのMg(II)との合体的组词(Ks)を问めたところ、リガンド:Mg(ID=2:1 Error body formationし、Ks=8.2 x10^2(ET-ligand), Ks=3.1 x10^3(Bu-ligand), Ks=3.8 x10^3(Hx-ligand)、であったリガンドの水solubleを. Consider the するとアルキル lock はブチルがphase 応しいものとJudgment された (2). ESI-MS is used to form complex metals, select metal properties, and select metal ratios.ところ、Mg(II)に対して Select the に2 volume body が to form the されることが分かった. In the coexistence of またCo(II), the formation of the multi-dot body and the clear composition ratio of the co-doped body are required. (3) 2 this lock DNA と の combination を エ チ ジ ウ ム ブロマ イ ド 合 実験 に よ り Comment 価 し た と こ ろ, ブ チル体リガンドとヘキシル体リガンドがほぼ The same degree of erroneous body formation can be shown as すことがわかった. The above-mentioned の検から, ジオール part and the な fault body formation part として effect していることをconfirmation することができなかったが, DNA への wrong body formation においてはアルキル lock の长さはブチルbase が であることが分かった.

项目成果

金属を介してDNA上に事故集積する低分子リガンドの効率的合成研究

通过金属在DNA上积累的小分子配体的高效合成研究

• 发表时间: 2010
• 作者: 水田昭平

金属錯体形成により2量体化しDNA結合能を示す水溶性低分子リガンドの効率的合成

高效合成水溶性低分子量配体，通过金属络合物形成二聚化并表现出 DNA 结合能力

• 发表时间: 2009
• 作者: Brazier;J. A.;Onishi I.;Sasaki S.;井福隆史;水田昭平
• 通讯作者: 水田昭平

Binding of two bis-bipyridine minor groove binders to a DNA template in the presence of Cu^<2+> ion.

在Cu 2 离子存在下，两个双联吡啶小沟结合物与DNA模板的结合。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Nucleic Acids Symp. Ser. 52
• 作者: Brazier;J. A.;Onishi I.;Sasaki S.
• 通讯作者: Sasaki S.

長い繰り返し配列を持つDNA上にCu2+を介して集積する分子の開発

开发通过 Cu2+ 在具有长重复序列的 DNA 上积累的分子

• 发表时间: 2008
• 作者: Watanabe;T.;Funakawa;S.;and Kosaki;T.;佐々木茂貴;佐々木茂貴;S. Sasaki;Shigeki Sasaki;野原昭広;内田祐子;大西一平
• 通讯作者: 大西一平