ストレス応答を制御するリン酸化シグナル解明への遺伝学的アプローチ

阐明控制应激反应的磷酸化信号的遗传方法

• 批准号: 20659292
• 负责人: 武田 弘資
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659292/
• 关键词: ストレス応答; シグナル伝達; リン酸化; MAPキナーゼ; 線虫

本研究は、われわれがこれまで携わってきたストレス応答キナーゼに関する研究手法ならびに研究成果をもとに、線虫C.elegansを用いた遺伝子探索によってストレス応答を制御する新たなリン酸化シグナル経路を見出し、口腔疾患の新たな予防、診断、治療法のターゲットとしての意義を探ろうとするものである。昨年度、われわれは哺乳類ASK1分子の線虫オルソログであるNSY-1の遺伝子変異個体が、無酸素状態において野生型個体に比べて生存率が上昇するという興味深い表現型を見いだし、NSY-1-PMK経路が無酸素に対する個体の応答に重要な役割を果たしていることを示した。本年度は、NSY-1下流で発現制御を受ける因子を探索するため,マイクロアレイを用いた遺伝子発現量の網羅的解析を行った。野生型において無酸素により発現量が2倍以上に増加し、かつ無酸素条件における発現量がnsy-1変異体において野生型の2分の1以下となる遺伝子を抽出した結果、13の遺伝子が得られた。定量的PCRにより結果を再確認し、さらにその中でPMK-1経路に依存した発現パターンを示した遺伝子を7つ候補遺伝子として得た。これらの遺伝子のプロモーター領域をそれぞれ単離し、その下流にGFPをつないだ外来性遺伝子を発現するトランスジェニック線虫を作製した。その結果、互いに異なる遺伝子プロモーターに由来する2系統が、NSY-1-PMK-1経路の活性に依存してGFPが発現することを確認し、蛍光顕微鏡を用いたバイオイメージングによってNSY-1-PMK-1経路の活性化をモニターできる系の確立に成功した。現在さらに、これらのトランスジェニック系統を用いたストレス応答制御因子の遺伝子スクリーニング系の構築を進めている。

This study is aimed at exploring new ways to prevent, diagnose and treat oral diseases. In the past year, the survival rate of mammalian ASK-1 gene variants increased compared with wild type individuals in the acid-free state, and the survival rate of NSY-1-PMK gene variants increased compared with wild type individuals in the acid-free state. This year, NSY-1 downstream detection and control factors were explored, and the analysis of the detection and control factors was carried out. The wild type has more than 2 times the amount of acid-free protein. The amount of acid-free protein is increased. The amount of acid-free protein is increased. The amount of acid-free protein is increased. The wild type has 2 points and less than 1 point. The result is that 13 genes are extracted. Quantitative PCR results were reconfirmed and the PMK-1 pathway was detected. The expression of the alien gene is controlled by the expression of the alien gene. As a result, the two systems were successfully established, and the dependence of NSY-1-PMK-1 circuit activity on GFP was confirmed. Now, the construction of the system of the control factor is progressing.

项目成果

ASKファミリー分子によるストレス応答の制御と疾患

ASK 家族分子控制应激反应和疾病

• 发表时间: 2010
• 作者: Imai;T.;Ichiro Tatsuno;武田弘資
• 通讯作者: 武田弘資

ALS-linked mutant SOD1 induces ER stress- and ASK1-dependent motor neuron death by targeting Derlin-1

• DOI: 10.1101/gad.1640108
• 发表时间: 2008-06-01
• 期刊: GENES & DEVELOPMENT
• 影响因子: 10.5
• 作者: Nishitoh, Hideki;Kadowaki, Hisae;Ichijo, Hidenori
• 通讯作者: Ichijo, Hidenori

Ubiquitin-like Sequence in ASK1 Plays Critical Roles in the Recognition and Stabilization by USP9X and Oxidative Stress-Induced Cell Death

• DOI: 10.1016/j.molcel.2009.10.016
• 发表时间: 2009-12-11
• 期刊: MOLECULAR CELL
• 影响因子: 16
• 作者: Nagai, Hiroaki;Noguchi, Takuya;Ichijo, Hidenori
• 通讯作者: Ichijo, Hidenori

A TNF- and c-Cbl-dependent FLIPS-degradation pathway and its function in Mycobacterium tuberculosis-induced macrophage apoptosis

• DOI: 10.1038/ni.1754
• 发表时间: 2009-08-01
• 期刊: NATURE IMMUNOLOGY
• 影响因子: 30.5
• 作者: Kundu, Manikuntala;Pathak, Sushil Kumar;Basu, Joyoti
• 通讯作者: Basu, Joyoti

ASKIの活性と機能の新たな制御機構(シンポジウム)

ASKI 活动和功能的新控制机制（研讨会）

• 发表时间: 2008
• 作者: 山畑佳篤、小池薫、平出敦;他;山畑佳篤;武田弘資,一條秀憲
• 通讯作者: 武田弘資,一條秀憲