ストレス応答を制御するリン酸化シグナル解明への遺伝学的アプローチ

阐明控制应激反应的磷酸化信号的遗传方法

• 批准号: 20659292
• 负责人: 武田 弘資
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659292/
• 关键词: ストレス応答; シグナル伝達; リン酸化; MAPキナーゼ; 線虫

本研究は、われわれがこれまで携わってきたストレス応答キナーゼに関する研究手法ならびに研究成果をもとに、線虫C.elegansを用いた遺伝子探索によってストレス応答を制御する新たなリン酸化シグナル経路を見出し、口腔疾患の新たな予防、診断、治療法のターゲットとしての意義を探ろうとするものである。昨年度、われわれは哺乳類ASK1分子の線虫オルソログであるNSY-1の遺伝子変異個体が、無酸素状態において野生型個体に比べて生存率が上昇するという興味深い表現型を見いだし、NSY-1-PMK経路が無酸素に対する個体の応答に重要な役割を果たしていることを示した。本年度は、NSY-1下流で発現制御を受ける因子を探索するため,マイクロアレイを用いた遺伝子発現量の網羅的解析を行った。野生型において無酸素により発現量が2倍以上に増加し、かつ無酸素条件における発現量がnsy-1変異体において野生型の2分の1以下となる遺伝子を抽出した結果、13の遺伝子が得られた。定量的PCRにより結果を再確認し、さらにその中でPMK-1経路に依存した発現パターンを示した遺伝子を7つ候補遺伝子として得た。これらの遺伝子のプロモーター領域をそれぞれ単離し、その下流にGFPをつないだ外来性遺伝子を発現するトランスジェニック線虫を作製した。その結果、互いに異なる遺伝子プロモーターに由来する2系統が、NSY-1-PMK-1経路の活性に依存してGFPが発現することを確認し、蛍光顕微鏡を用いたバイオイメージングによってNSY-1-PMK-1経路の活性化をモニターできる系の確立に成功した。現在さらに、これらのトランスジェニック系統を用いたストレス応答制御因子の遺伝子スクリーニング系の構築を進めている。

This study is based on the research of the われわれがこれまで and the わってきたストレス応answer キナーゼに关するTechniques and research results of ならびにをもとに, nematode C.elegansをExploration with いた缝子によOral diseases New prevention, diagnosis, and treatment method of prevention, diagnosis, and treatment. Last year, the survival rate of the mammalian ASK1 molecule of the nematode Nematode elegans Nematode NSY-1 was different from that of the wild-type individual in the acid-free state. NSY-1-PMK経路It's important that the acid-free element is used individually and the answer is important. This year, NSY-1 is an analysis of the current net of the obscene factor and the analysis of the current net of the net. The wild-type acid-free acid-free acid-free condition is more than 2 times higher than the original acid-free condition. -1 変 variant に お い て wild type の 2 points と な る 伝子 を draw し た results, 13 の 伝子 が got ら れ た 1 or less. Quantitative PCR results re-confirmation PMK-1 roadにdependenceした発appearsパターンをshowsした缝子を7つ candidate 伝子としてgetsた.これらの缝子のプロモーター区をそれぞれ単利し、そのdegradableにGFPをつないだExogenous inheritance 伝子を発 appear するトランスジェニック nematode をした.そのRESULT, mutual いにdifferent なる伝子プロモーターに origin する2 SYSTEM が, NSY-1-PMK-1経路 のactive にdependence して GFP が発appear することをConfirmation, いたバイオイメージングによってNSY- The activation of 1-PMK-1 road has been successfully established and the system has been successfully established. Now the system of さらに、これらのトランスジェニック is used by いたストレThe control factor of the control factor is the remaining element of the system.

项目成果

ALS-linked mutant SOD1 induces ER stress- and ASK1-dependent motor neuron death by targeting Derlin-1

• DOI: 10.1101/gad.1640108
• 发表时间: 2008-06-01
• 期刊: GENES & DEVELOPMENT
• 影响因子: 10.5
• 作者: Nishitoh, Hideki;Kadowaki, Hisae;Ichijo, Hidenori
• 通讯作者: Ichijo, Hidenori

ASKファミリー分子によるストレス応答の制御と疾患

ASK 家族分子控制应激反应和疾病

• 发表时间: 2010
• 作者: Imai;T.;Ichiro Tatsuno;武田弘資
• 通讯作者: 武田弘資

A TNF- and c-Cbl-dependent FLIPS-degradation pathway and its function in Mycobacterium tuberculosis-induced macrophage apoptosis

• DOI: 10.1038/ni.1754
• 发表时间: 2009-08-01
• 期刊: NATURE IMMUNOLOGY
• 影响因子: 30.5
• 作者: Kundu, Manikuntala;Pathak, Sushil Kumar;Basu, Joyoti
• 通讯作者: Basu, Joyoti

Ubiquitin-like Sequence in ASK1 Plays Critical Roles in the Recognition and Stabilization by USP9X and Oxidative Stress-Induced Cell Death

• DOI: 10.1016/j.molcel.2009.10.016
• 发表时间: 2009-12-11
• 期刊: MOLECULAR CELL
• 影响因子: 16
• 作者: Nagai, Hiroaki;Noguchi, Takuya;Ichijo, Hidenori
• 通讯作者: Ichijo, Hidenori

ASKIの活性と機能の新たな制御機構(シンポジウム)

ASKI 活动和功能的新控制机制（研讨会）

• 发表时间: 2008
• 作者: 山畑佳篤、小池薫、平出敦;他;山畑佳篤;武田弘資,一條秀憲
• 通讯作者: 武田弘資,一條秀憲