Evaluation of cDNA synthesis and RNA amplification with highly efficient reverse transcriptases and expansion of their use

使用高效逆转录酶评估 cDNA 合成和 RNA 扩增及其用途扩展

• 批准号: 21580110
• 负责人: YASUKAWA Kiyoshi
• 金额: $ 3.16万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21580110/
• 关键词: 酵素利用学; ウイルス; 核酸; 酵素; 酵素反応; バイオテクノロジー

We generated highly thermostable reverse transcriptases from Moloney murine leukemia virus and avian myeloblastosis virus(E286R/E302K/L435R/D524A and V238R/L388R/D450A, respectively) by site-directed mutagenesis. It is suggested that introduction of positive charges into reverse transcriptases at positions that have been implicated in the interaction with T/P is effective to stabilize reverse transcriptases.

通过定点诱变，从Moloney小鼠白血病病毒和禽成髓细胞病病毒（分别为E286R/E302K/L435R/D524A和V238R/L388R/D450A）中获得了高度耐热的逆转录酶。这表明，在与T/P相互作用有关的位置引入正电荷可以有效地稳定逆转录酶。

项目成果

部位特異的変異導入によるAMV逆転写酵素αサブユニットの熱安定性の向上

通过定点突变提高AMV逆转录酶α亚基的热稳定性

• 发表时间: 2012
• 作者: 小西篤;保川清;井上國世
• 通讯作者: 井上國世

Insight into the Mechanism of the Stabilization of Moloney Murine Leukaemia Virus Reverse Transcriptase by Eliminating RNase H Activity

• DOI: 10.1271/bbb.90777
• 发表时间: 2010-02-01
• 期刊: BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY AND BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 1.6
• 作者: Mizuno, Masaki;Yasukawa, Kiyoshi;Inouye, Kuniyo
• 通讯作者: Inouye, Kuniyo

AMV逆転写酵素とMMLV逆転写酵素の熱安定性に対する鋳型プライマーの効果

模板引物对AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶热稳定性的影响

• 发表时间: 2009
• 作者: 保川清;根本大資;井上國世
• 通讯作者: 井上國世

組換えHIV-1逆転写酵素の調製と性状解析

重组HIV-1逆转录酶的制备及表征

• 发表时间: 2012
• 作者: 保川清;篠村まゆ;井上國世
• 通讯作者: 井上國世

Comparison of the thermal stabilities of theαβheterodimer andαsubunit of avian myeloblastosis virus reverse transcriptase

禽成髓细胞瘤病毒逆转录酶αβ异二聚体和α亚基的热稳定性比较

• 发表时间: 2011
• 作者: 小西篤;根本大資;保川清;井上國世
• 通讯作者: 井上國世