课题基金 / 基金详情

シナプス前クロライド濃度勾配の発生機構の解明

シナプス前クロライド濃度勾配の発生機構の解明
阐明突触前氯离子浓度梯度的产生机制
批准号：
21650093
负责人：
神谷 温之
金额：
$1.98万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2009 至 2010
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21650093/
关键词：
海馬シナプス伝達GABAクロライドイオン

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
海馬苔状線維シナプスのシナプス前都にはGABA_A受容体が発現することが近年の研究で明らかになった。クロライドチャンネルであるGABA_A受容体の活性化により苔状線維終末の脱分極を生じることから、シナプス前部では細胞内クロライド濃度が細胞体より高く保たれていると推定されている。今年度は、細胞内クロライド濃度の神経細胞内の空間的な分布や濃度勾配を直接的に証明するために、蛍光クロライド指示薬を用いたシナプス前部でのクロライドイメージングを試みた。マウス海馬スライス標本において苔状線維の起始細胞である歯状回顆粒細胞に単一細胞レベルで蛍光クロライド指示薬MEQを負荷するために、単一細胞エレクトロボレーションの条件検討を行い、小型の細胞である歯状回顆粒細胞の細胞体に直視下に蛍光色素を効率的に導入することが可能になった。しかしながら、顆粒細胞の軸索である苔状線維軸索は極めて微細で、また、スライス内を立体的に走行し、共焦点顕微鏡を用いても苔状線維の神経終末部まで連続して蛍光をモニターすることが困難な場合がしばしばであった。そこで、もうひとつのアプローチとして、細胞膜透過型蛍光クロライド指示薬であるdihydro-MEQ(6-methoxy-N-ethyl-1,2-dihydroquinoline)を軸索標識法により多くの苔状線維に同時に導入することを試みている。苔状線維軸索の走行するCA3野透明層にdihydro-MEQを微量注入し、軸索内に取り込まれた後に軸索輸送の機構を介して輸送されることを利用して、多くのスライス表面の苔状線維シナプス前部(終末部および軸索部)に蛍光クロライド指示薬を負荷するための条件検討を行った。
英文摘要
海馬苔状線維シナプスのシナプス前都にはGABA_A受容体が発現することが近年の研究で明らかになった。クロライドチャンネルであるGABA_A受容体の活性化により苔状線維終末の脱分極を生じることから、シナプス前部では細胞内クロライド濃度が細胞体より高く保たれていると推定されている。今年度は、細胞内クロライド濃度の神経細胞内の空間的な分布や濃度勾配を直接的に証明するために、蛍光クロライド指示薬を用いたシナプス前部でのクロライドイメージングを試みた。マウス海馬スライス標本において苔状線維の起始細胞である歯状回顆粒細胞に単一細胞レベルで蛍光クロライド指示薬MEQを負荷するために、単一細胞エレクトロボレーションの条件検討を行い、小型の細胞である歯状回顆粒細胞の細胞体に直視下に蛍光色素を効率的に導入することが可能になった。しかしながら、顆粒細胞の軸索である苔状線維軸索は極めて微細で、また、スライス内を立体的に走行し、共焦点顕微鏡を用いても苔状線維の神経終末部まで連続して蛍光をモニターすることが困難な場合がしばしばであった。そこで、もうひとつのアプローチとして、細胞膜透過型蛍光クロライド指示薬であるdihydro-MEQ(6-methoxy-N-ethyl-1,2-dihydroquinoline)を軸索標識法により多くの苔状線維に同時に導入することを試みている。苔状線維軸索の走行するCA3野透明層にdihydro-MEQを微量注入し、軸索内に取り込まれた後に軸索輸送の機構を介して輸送されることを利用して、多くのスライス表面の苔状線維シナプス前部(終末部および軸索部)に蛍光クロライド指示薬を負荷するための条件検討を行った。
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会议论文
NMDA Receptor GluN2B (GluRε2/NR2B) Subunit Is Crucial for Channel Function, Postsynaptic Macromolecular Organization, and Actin Cytoskeleton at Hippocampal CA3 Synapses
DOI： 10.1523/jneurosci.5531-08.2009
发表时间： 2009-09-02
期刊： JOURNAL OF NEUROSCIENCE
影响因子： 5.3
作者： [Akashi, Kaori, Kakizaki, Toshikazu, Sakimura, Kenji]
通讯作者： Sakimura, Kenji
Heterosynaptic enhancement of the excitability of hippocampal mossy fibers by long-range spill-over of glutamate
谷氨酸远程溢出对海马苔藓纤维兴奋性的异质突触增强
DOI： 10.1002/hipo.20885
发表时间： 2012
期刊： Hippocampus
影响因子： 3.5
作者： [Uchida T., Fukuda S., Kamiya H.]
通讯作者： Kamiya H.
Bumetanide-sensitive and -insensitive actions of GABA_A receptors on the excitability of the hippocampal mossy fibers
GABA_A 受体布美他尼敏感和不敏感作用对海马苔藓纤维兴奋性的影响
DOI： --
发表时间： 2009
期刊：
影响因子： --
作者： [Kamiya, H.]
通讯作者： H.
光不活化法による海馬CA1野シナプスAMPA受容体動態の長期計測
利用光失活法长期测量海马 CA1 区突触 AMPA 受体动态
DOI： --
发表时间： 2011
期刊：
影响因子： --
作者： [Yamazaki D, Horiuchi J, Miyashita T, Saitoe M., 神谷温之]
通讯作者： 神谷温之
共 6 条
    Subcellular analysis of the mechanism underlying ectopic spike generation in axon
    • 批准号：
      21K06434
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $2.66万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      神谷 温之
    • 依托单位：
      Hokkaido University
    光不活化法によるグルタミン酸受容体トラフィックのリアルタイム解析
    • 批准号：
      18059001
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.14万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      神谷 温之
    • 依托单位：
      Hokkaido University
    海馬シナプスにおける神経活動依存的な伝達物質スイッチング
    • 批准号：
      18021001
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $4.86万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      神谷 温之
    • 依托单位：
      Hokkaido University
    光分子不活化法によるシナブス機能の光操作法の開発
    • 批准号：
      18650106
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.11万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      神谷 温之
    • 依托单位：
      Hokkaido University
    海外基金