インフルエンザウイルスのゲノム複製に視点をおいた細胞特異性及び宿主域解析

重点关注流感病毒基因组复制的细胞特异性和宿主范围分析

• 批准号: 09J00964
• 负责人: 川口 敦史
• 金额: $ 5.76万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J00964/
• 关键词: インフルエンザウイルス; 宿主因子; 抗ウイルス薬; RNAポリメラーゼ; in silicoスクリーニング; MCM

近年の疫学研究から、細胞に感染後、ウイルスの転写およびゲノム複製活性の違いを一因として、インフルエンザウイルスの病原性や宿主域が規定されることが議論されている。インフルエンザウイルスゲノムの複製反応は宿主因子への依存性が高く、精製したウイルスポリメラーゼのみでは、試験管内においてゲノム複製反応は再現されない。そこで本研究では、インフルエンザウイルスゲノム複製の分子機構の解明、および、その反応を支える宿主およびウイルス由来の因子の同定を目的とし、インフルエンザウイルスの細胞特異性および宿主域の理解に資することを目的とした。これまでに試験管内ウイルスゲノム複製反応を促進する宿主因子として、IREF-1/MCM複合体を同定した。MCM存在下でウイルスポリメラーゼはProcessiveなRNA合成を行い、全長のウイルスゲノムを複製することが明らかになった。本年度では、ウイルスゲノムに結合し、Ribonucleoprotein(RNP)複合体の形成に必須であるウイルスタンパク質NPによっても、ウイルスゲノム複製は促進されることを見出し、NPはウイルスポリメラーゼが開始反応から伸長反応へ移行するのに必要であることを明らかにした。さらに、この過程にはNPの分子シャペロンとして機能する宿主由来のスプライシング関連因子であるUAP56が促進因子として機能し、子孫ウイルスRNP複合体形成と協調してRNA合成反応を促進することを明らかにした。また、複製後のウイルスゲノムは、細胞核内から細胞質へと輸送され、細胞膜の頂端面から出芽するが、その詳細な輸送機構は不明であった。感染細胞内のウイルスゲノムをウイルスRNPに対する特異的抗体もしくはFISH法で可視化し、その動態解析を行ったところ、ウイルスRNPの細胞内輸送は微小管依存的でありRab11陽性の小胞輸送を介した経路によって能動輸送されていることを明らかにした。

In recent years, epidemiological studies have been carried out on the regulation of pathogenic and host domains after cell infection and replication activity. The host factor is highly dependent on the replication process, and the host factor is highly dependent on the replication process, and the host factor is highly dependent on the replication process. This study aims to elucidate the molecular machinery of replication, the identity of factors responsible for its origin, and the understanding of cell specificity and host domains. The host factor, IREF-1/MCM complex, which promotes the replication of DNA in these cells, is identified. In the presence of MCM, it is necessary to carry out RNA synthesis, full-length RNA replication, and so on. This year, it is necessary for the formation of Ribonucleoprotein(RNP) complexes to be promoted by replication. In addition, this process involves the formation and coordination of RNP molecules and the promotion of RNA synthesis by UP56 as a promoter factor. After replication, the cytoplasmic transport mechanism in the nucleus, the apical surface of the cell membrane, and the detailed transport mechanism are unknown. Specific antibodies against RNP in infected cells are visualized by FISH and analyzed dynamically. Intracellular transport of RNP is microtubule-dependent. Rab11-positive cellular transport is mediated by cellular pathways.

项目成果

インフルエンザウイルスRNAポリメラーゼの構造生物学

流感病毒RNA聚合酶的结构生物学

• 发表时间: 2009
• 期刊: ウイルス 59
• 作者: 内藤忠相;川口敦史;永田恭介
• 通讯作者: 永田恭介

Structure-based discovery of anti-influenza virus A compounds among medicines

• DOI: 10.1016/j.bbagen.2011.11.003
• 发表时间: 2012-02-01
• 期刊: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS
• 影响因子: 3
• 作者: Fukuoka, Mayuko;Minakuchi, Moeko;Kuwata, Kazuo
• 通讯作者: Kuwata, Kazuo

インフルエンザウイルスゲノムの複製に関する宿主因子

与流感病毒基因组复制相关的宿主因素

• 发表时间: 2009
• 期刊: PNE増刊 54
• 作者: 川口敦史;若井ちとせ;永田恭介
• 通讯作者: 永田恭介

A novel function of NS1 influenza virus protein in virus growth

NS1流感病毒蛋白在病毒生长中的新功能

• 发表时间: 2011
• 作者: 内藤忠相;川口敦史;永田恭介;Osari S.
• 通讯作者: Osari S.