インフルエンザウイルスのゲノム機能により規定される細胞特異性及び宿主域の解析

流感病毒基因组功能决定的细胞特异性和宿主范围分析

• 批准号: 06J03920
• 负责人: 川口 敦史
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J03920/
• 关键词: インフルエンザウイルス; RNAポリメラーゼ; 宿主因子; 試験管内RNA合成系; MCM

これまでのインフルエンザウイルスに関する生化学的解析から、ウイルス遺伝子の転写およびウイルスゲノムの複製には、宿主因子が必須であることが明らかにされた。特に、ウイルスゲノムの複製反応は、宿主因子への依存性が高く、試験管内RNA合成系において、ウイルス粒子より調製されたウイルスRNAポリメラーゼ複合体のみでは、ウイルスゲノムの複製反応は観察されない。また、子孫ウイルス粒子の産生には、効率の良いウイルスゲノム複製が必須であり、インフルエンザウイルス感染に対して非許容な細胞では、ウイルスゲノム複製量の低下が観察される。しかし、ウイルスゲノムの複製機構に関しては、遺伝学を用いた報告があるのみであり、複製反応の分子機構および細胞特異性に関しては未だ明らかにされていない。そこで本研究では、インフルエンザウイルスゲノム複製の分子機構およびその反応を支える宿主因子によるインフルエンザウイルスの細胞特異性および宿主城の決定機構を明らかにすることを目的とした。昨年度までに、インフルエンザウイルスのゲノム複製を促進する宿主因子、Influenza virus REplication Factor-1 (IREF-1)の同定に成功した。今年度、質量分析法より、IREF-1はMinichromosome mainenance (MCM)2、3、4、5、6、7よりなるヘテロ6量体であることが明らかになった。MCM複合体は、DNA複製のライセンシング因子であり、DNA複製開始反応を制御するヘリカーゼであることが報告されている。RNAi法を用いて、MCMの発現量を低下させた培養細胞では、ウイルスゲノム複製活性が低下した。さらに、MCM複合体が新規合成鎖とウイルスRNAポリメラーゼに結合することで、RNA合成伸長反応複合体が安定化され、その結果、ウイルスRNAポリメラーゼのProcessivityが促進されることを明らかにした。また、今後は、細胞種間、組織間、および宿主間でのMCM複合体の発現量およびその活性の違いを検討し、MCM複合体によって規定される細胞特異性、組織特異性および宿主域についても解析を行っていく予定である。

The biochemical analysis of these factors, their molecular structure and replication, and host factors must be reversed. In particular, it is necessary for the replication of the virus, host factor dependence is high, and the RNA synthesis system in the test tube is modulated by its particles, and the replication of the virus is detected. The production and efficiency of these particles are important for replication, but the infection of these particles is not allowed. The molecular mechanism of replication and cell specificity are reported. The aim of this study is to clarify the molecular mechanisms for replication and the mechanisms for reverse transcription of host factors and their cell-specific and host-specific determinants. In the past year, the identification of host factors, Influenza Virus Replication Factor-1 (IREF-1), which promote replication of influenza viruses, was successful. This year, quality analysis method, IREF-1 Minichromosome maintenance (MCM) 2, 3, 4, 5, 6, 7 MCM complex DNA replication initiation factors, DNA replication factors When RNAi was used, MCM production decreased, and cell replication activity decreased. In addition, MCM complex is a new synthesis lock, RNA synthesis elongation reaction complex is stable, and the result is that MCM complex is a new synthesis lock, RNA synthesis elongation reaction complex is stable, and RNA synthesis reaction complex is promoted. In the future, the expression and activity of MCM complexes between cell species, tissues, and hosts will be investigated. The analysis of MCM complexes will be determined according to the cell-specific, tissue-specific, and host-domain specifications.

项目成果

De novo replication of the influenza virus RNA genome is regulated by a DNA replicative helicase, MCM.

流感病毒 RNA 基因组的从头复制受到 DNA 复制解旋酶 MCM 的调节。

• 发表时间: 2007
• 期刊: EMBO J. 26
• 作者: 小林;亮介;立脇 洋介;立脇 洋介;立脇 洋介;Kawaguchi A.
• 通讯作者: Kawaguchi A.

Involvement of Hsp90 in assembly and nuclear import of influenza virus RNA polymerase subunits

• DOI: 10.1128/jvi.01917-06
• 发表时间: 2007-02-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Naito, Tadasuke;Momose, Fumitaka;Nagata, Kyosuke
• 通讯作者: Nagata, Kyosuke

インフルエンザウイルスゲノム複製に関与する新規宿主因子として同定したIREF-1の機能

IREF-1的功能被确定为参与流感病毒基因组复制的新型宿主因子

• 发表时间: 2007
• 作者: 小林;亮介;立脇 洋介;立脇 洋介;立脇 洋介;Kawaguchi A.;Naito T.;川口敦史
• 通讯作者: 川口敦史