変異原性傷害塩基O(6)-メチルグアニンに対する新規修復経路の解明

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O^6-メチルグアニン(O^6-meG)は変異原性を持つ細胞毒性塩基であり、予期せぬアポトーシスを引き起こす引き金となることも知られている。一般的によく知られたO^6-meG修復酵素であるOgtと高い配列相同性を示すにも関わらず、単独での修復活性を示さないalkyltransferase-likeタンパク質(ATLタンパク質)を中心とした新規メチル化傷害修復経路の解明を目指して研究を行っている。当初はATLタンパク質がO^6-meGを認識して結合し、ヌクレオチド除去修復を駆動するUvrAを呼び込む系を想定していたが、ヌクレオチド除去修復再構成系にATLタンパク質を加えてもO^6-meG特異的なDNA切断は見られず、また、より大きな付加物を含む傷害DNAを基質とした場合、切断活性を阻害した。このことから、存在が予想される新規修復経路は、ATLタンパク質が直接的にUvrAの基質特異性を広げる単純な修復様式を持つのではないことが示唆され、また、ATLタンパク質によるエピスタシス解析により、ヌクレオチド除去修復とATLタンパク質が同経路で修復に働いていることが示され、質量分析計を用いて直接の測定によりATLタンパク質欠損株においてO^6-meGの蓄積が確認できた。DNAマイクロアレイ解析を行ったところ、アルキル化剤添加条件でATLタンパク質依存的に発現上昇が起こる遺伝子が同定された。ATLタンパク質のRNAポリメラーゼとの相互作用も確認できたことから、ATLタンパク質は、アルキル化応答タンパク質を発現制御している可能性が示唆された。