細胞内における銅制御因子のクロストーク機構の解明
阐明细胞内铜调节因子的串扰机制
基本信息
- 批准号:09J04232
- 负责人:
- 金额:$ 1.22万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2010
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
近年、細胞内の銅濃度を制御するシャペロンやトランスポーターの存在が明らかとなり、個々の性質については解明されつつあるが、銅の制御に関わるタンパク質が細胞内でどのように協働しているかは明らかになっていない。本研究では、銅排泄に関わると想定されているCOMMD1と銅シャペロンであるCCSをRNA干渉法により抑制したときの細胞内の銅の挙動や銅関連遺伝子の応答を、高速液体クロマトグラフィー-誘導結合プラズマ質量分析法すなわちスペシエーション、分子細胞生物学的手法、そして、元素イメージングにより解析することにより、銅の制御に関わる各因子間のクロストーク機構を明らかにすることを目的とした。銅排泄に関わるとされているCOMMD1を抑制すると、細胞内の銅含有量は有意に上昇し、増加した銅は細胞質に分布していて、銅の化学形態はメタロチオネインに結合した状態で存在していた。また、COMMD1の新規機能として、銅排泄トランスポーターAtp7bの細胞内局在や安定性に重要な役割を果たしていることが示された。Ccsのノックダウンにより、細胞内の銅関連遺伝子は銅過剰の応答を示す。SOD1に銅を供給するCcsが抑制されることで細胞内の銅代謝系に銅が分布したと考えられた。しかし、Ccsの減少により細胞内銅代謝系の変動が起きているにも関わらず、SOD1の活性や発現量、銅結合量に大きな変化は見られなかった。これは、通常CcsはSOD1の活性化に必要な量より過剰に存在しており、銅制御系はSOD1の活性を優先的に保っている可能性があると示唆された。
In recent years, concentration of intracellular の copper を suppression す る シ ャ ペ ロ ン や ト ラ ン ス ポ ー タ ー の is が Ming ら か と な り, a 々 の nature に つ い て は interpret さ れ つ つ あ る が, copper の suppression に masato わ る タ ン パ ク qualitative が intracellular で ど の よ う に association 働 し て い る か は Ming ら か に な っ て い な い. This study で は, copper excretion に masato わ る と scenarios さ れ て い る COMMD1 と copper シ ャ ペ ロ ン で あ る CCS を RNA dry involved method に よ り inhibit し た と き の intracellular copper の の 挙 dynamic や copper masato even heritage 伝 son の 応 answer を, high-speed liquid ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー - induced combining プ ラ ズ マ quality analysis す な わ ち ス ペ シ エ ー シ ョ ン, molecules are fine Cell biology technique, そ し て, element イ メ ー ジ ン グ に よ り parsing す る こ と に よ り, copper の suppression に masato わ る among various factors の ク ロ ス ト ー ク institutions を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. Copper excretion に masato わ る と さ れ て い る COMMD1 を inhibit す る と, intracellular の copper containing は intentionally に rise し, rights and し た copper は cytoplasm に distribution し て い て, copper の chemical form は メ タ ロ チ オ ネ イ ン に combining し た state で exist し て い た. ま た, COMMD1 の new rules function と し て, copper excretion ト ラ ン ス ポ ー タ ー Atp7b の bureau in cells in や stability に important な "を cut fruit た し て い る こ と が shown さ れ た. Ccs ノッ ノッ ダウ ダウ によ によ ダウ, intracellular <s:1> copper-related progeny 伝 伝 copper globogenitor 応 応 answer を す. SOD1 に copper を supply す る Ccs が inhibit さ れ る こ と で の copper metabolism in cells is に copper が distribution し た と exam え ら れ た. し か し, Ccs の reduce に よ り copper metabolism in cells is の - move since が き て い る に も masato わ ら ず, SOD1 の active や, copper combination amount 発 now に big き な variations change は see ら れ な か っ た. こ れ は, usually Ccs は SOD1 の activeness に necessary な amount よ り before turning に exist し て お り, copper royal は SOD1 の active を priority に bartender っ て い る possibility が あ る と in stopping さ れ た.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Roles of COMMD1 in stability and recruitment of the copper-transporter ATP7B in a mouse hepatoma cell line
COMMD1 在小鼠肝癌细胞系中铜转运蛋白 ATP7B 的稳定性和招募中的作用
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:小椋康光;宮山貴光;宮山貴光 (第一著者・発表者)
- 通讯作者:宮山貴光 (第一著者・発表者)
銅シャペロンCCSノックダウンを導入したメタロチオネイン欠損マウス線維芽細胞におけるSOD1の活性と銅分布
导入铜伴侣 CCS 敲低的金属硫蛋白缺陷型小鼠成纤维细胞中 SOD1 活性和铜分布
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:石塚雄大;飯嶋友美;平岡大祐;宮山貴光;小椋康光;宮山貴光 (第一著者・発表者)
- 通讯作者:宮山貴光 (第一著者・発表者)
Copper accumulation in COMMD1-knockdown mouse hepatoma cells
COMMD1 敲低小鼠肝癌细胞中铜的积累
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:平岡大祐、宮山貴光;阿南弥寿美、小椋康光;宮山貴光(第一著者・発表者)
- 通讯作者:宮山貴光(第一著者・発表者)
Copper accumulation and compartmentalization in mouse fibroblast lacking metallothionein and copper chaperone, Atoxl
缺乏金属硫蛋白和铜伴侣 Atoxl 的小鼠成纤维细胞中的铜积累和区室化
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:T.Miyayama;K.T.Suzuki;Y.Ogra
- 通讯作者:Y.Ogra
Roles of COMM-domain-containing 1 in stability and recruitment of the copper-transporting ATPase in a mouse hepatoma cell line
- DOI:10.1042/bj20100223
- 发表时间:2010-07-01
- 期刊:
- 影响因子:4.1
- 作者:Miyayama, Takamitsu;Hiraoka, Daisuke;Ogra, Yasumitsu
- 通讯作者:Ogra, Yasumitsu
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宮山 貴光其他文献
Elucidation of cross talk mechanisms among copper regulating proteins in mammalian cells
- DOI:
- 发表时间:
2009 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
宮山 貴光 - 通讯作者:
宮山 貴光
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