新規遺伝子改変マウス作出による性ステロイドホルモンの骨組織分子基盤の解析

通过创建新的转基因小鼠来分析性类固醇激素的骨组织分子基础

• 批准号: 09J05730
• 负责人: 金藤 紫乃
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J05730/
• 关键词: 遺伝子改変動物; 性ホルモン受容体; 骨細胞; メカニカルストレス; 骨代謝; 性ステロイドホルモン受容体; エストロゲン受容体; 骨芽細胞

硬組織中に多数存在する骨細胞は、メカニカルストレス伝達やCa/P代謝に関与するタンパクの分泌などにより、骨代謝に深く関与していると考えられる。そこで本研究では、骨細胞でのエストロゲン作用を明らかにするために、Dmp1-CreマウスとERαfloxマウスの交配により骨細胞特異的ERα欠損マウス(Dmp1-ERαKO)を作出し解析した。前年度の結果より、Dmp1-ERαKOは対照群と比べ、骨形成低下による骨量低下が認められた。すなわち、エストロゲンが骨細胞のERαを介して、骨芽細胞数を正に制御している可能性が示唆された。そこで本年度はこのメカニズムを明らかにすべく、フローサイトメトリーによるDmp1-ERαKOの骨細胞の単離を試みた。骨細胞は硬組織に埋まっており単純な酵素処理のみでは単離が不可能であるため、まずフローサイトメトリーによりDmp1-GFPマウスから骨細胞を単離する方法を確立した。本単離法は、マーカー遺伝子の発現を確認した限りでは、酵素処理によるフラクションの分取に比べ、骨細胞が骨表面の骨芽細胞から純度の高く単離できることが確認された。系の確立後は、Dmp1-GFPマウスとDmp1-ERαKOや対照群を交配することにより、Dmp1-ERαKO・対照群の骨細胞を単離し、マイクロアレイによりそれらの遺伝子発現プロファイルを比較した。その結果、いくつかの標的遺伝子候補群を取得することに成功した。また、ERαは過剰荷重による骨量増加に関与することが報告されているため、メカニカルストレスに対する骨細胞のERαの機能を明らかにするために、尾部懸垂により4週間の非荷重実験を施行したところ、Dmp1-ERαKOの大腿骨骨幹部の骨量は、対照群の同部位と比較して有意に減少した。このことから、骨細胞のERαは非荷重状態においても骨量維持に寄与していることが示唆された。以上、本年度は骨細胞のERαの標的遺伝子候補群を取得することに成功した。また、非荷重状態においても骨細胞のERαが骨防御作用を担っていることを明らかにした。

In most of the hard tissues, there are bone marrow cells, Ca/P cells, bone cells and bone cells. The purpose of this study was to analyze the effects of ER α deficiency gene (Dmp1-ER α KO) in bone specific cells in this study. The results showed that ER α deficiency gene (Dmp1-ER α KO) was detected in bone cells. In the previous year, the results showed that the results of Dmp1-ER α KO test, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone mass, low bone mass, low bone formation, low bone mass, low bone mass The number of ER α cells and the number of bone bud cells are positive to control the possibility of infection. This year, you will need to know that the Dmp1-ER α KO bone marrow cells are isolated from the test. It is not possible to make sure that the bone tissue is isolated from the bone tissue, the bone tissue, the bone In this method, we can make sure that the limit is limited, the enzyme is analyzed, and the degree of bone bud on the surface of the bone is high. Make sure to set up, Dmp1-GFP, Dmp1-ER α KO, mating, Dmp1-ER α, and so on, so that you can see that you have a baby. The result of the experiment shows that the child phenotype of this cluster is successful and successful. The weight of bone, ER α, Dmp1-ER α were measured in the report, and the results showed that there was a significant reduction in bone mass of thigh bone in the same part of the body. The bone mass maintenance of bone marrow cells (ER α) is not loaded, and the bone mass maintenance is sent to the bone cells to indicate that they are instigated. Above, the sub-phenotype of this year's bone cell ER α has achieved success. The body weight, non-load status, bone cell, ER α, bone defense function, bone defense, bone defense, bone cell, bone cell, bone

项目成果

Regulation of Bone Metabolism by Nuclear Receptors

核受体对骨代谢的调节

• 发表时间: 2009
• 期刊: Mol Cell Endocrinol (In press)
• 作者: Imai Y;Kondoh S;KouzmenkoA;Kato S
• 通讯作者: Kato S

Minireview : osteoprotective action of estrogens is mediated by osteoclastic estrogen receptor-alpha.

小评论：雌激素的骨保护作用是由破骨细胞雌激素受体-α介导的。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Mol.Endocrinol.
• 作者: Imai;Y.;Kondoh;S.;Kouzmenko;A.;Kato;S.
• 通讯作者: S.

Estrogen Receptor a (ERα) Expression in Osteocytes is Necessary to Maintain Normal Bone Mineral Density (BMD) and Reduce Bone Loss due to Unloading

骨细胞中雌激素受体 a (ERα) 的表达对于维持正常骨矿物质密度 (BMD) 和减少卸载引起的骨损失是必要的

• 发表时间: 2011
• 作者: Shino Kondoh;Yuuki Imai;Lynda F Bonewald;Shigeaki Kato
• 通讯作者: Shigeaki Kato

骨芽細胞のER<を介したエストロゲンの骨量維持作用の解析

ER介导的雌激素对成骨细胞骨量维持作用分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 金藤紫乃;今井祐記;高田伊知郎;松本高広;加藤茂明
• 通讯作者: 加藤茂明

Mechanical induction of PGE2 in osteocytes blocks glucocorticoid-induced apoptosis through both the β-catenin and PKA pathways.

• DOI: 10.1002/jbmr.168
• 发表时间: 2010-12
• 期刊: JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH
• 影响因子: 6.2
• 作者: Kitase, Yukiko;Barragan, Leonardo;Qing, Hai;Kondoh, Shino;Jiang, Jean X.;Johnson, Mark L.;Bonewald, Lynda F.
• 通讯作者: Bonewald, Lynda F.