Strukturelle Charakterisierung der L-Aminosäureoxidase aus Rhodococcus opacus und zufällige/strukturbasierte Mutagenese zur Aufklärung des Reaktionsmechanismus

混浊红球菌 L-氨基酸氧化酶的结构表征和随机/基于结构的诱变以阐明反应机制

• 批准号: 5387022
• 负责人: Professor Dr. Dietmar Schomburg
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung für Bioinformatik und Biochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5387022?language=en
• 关键词: Strukturelle; Charakterisierung; der; Aminos; ureoxidase

Im Rahmen dieses Projektes soll eine bakterielle L-Aminosäureoxidase strukturell charakterisiert werden. Bislang existieren nur Strukturinformationen zu einer eukaroytischen L-Aminosäureoxidase. Die Aufgabe dieses Enzyms im Stoffwechsel der Bakterien ist bislang noch nicht untersucht worden. Mit Hilfe der Röntgenstrukturananlyse soll daher zunächst die dreidimensionale Struktur der bakteriellen L-Aminosäureoxidase aus Rhodococcus opacus aufgeklärt werden. Darüber hinaus sollen Mutageneseexperimente durchgeführt werden, die zum Verständnis des Reaktionsmechanismus auf molekularer Ebene beitragen sollen. Die Bestimmung der Lokalisierung des Proteins in der Zelle soll zusätzlich Hinweise auf die Rolle des Enzyms im Stoffwechsel der Zelle liefern. Im Rahmen des Projektes soll auch die Eignung von Streptomyces als heterologes Expressionssystem besonders für Seleno-Methionin-Mutanten untersucht werden, die für die Strukturaufklärung in den letzten Jahren immer wichtiger geworden sind. Die Expression von aktivem, rekombinanten Protein ist häufig in E. coli nicht möglich. Daher würde ein alternatives Expressionssystem, welches die rekombinante Herstellung von Proteinen und deren Mutanten ermöglicht, von großem Vorteil sein.

Im Rahmen dieses Projektes soll eine bakterielle L-Aminosaureoxidase strukturel charakterisiert韦尔登. Bislang referencing努尔Strukturinformationen zu einer einer eukaroytischen L-Aminosäureoxidase.在面包店的货架上添加酶还不够沃登。Röntgenstrukturananlyse的方法是通过韦尔登产生的L-氨基脲氧化酶的三维结构。因此，我们必须通过韦尔登实验，使反应机制在分子水平上得到验证。Die Estimmung der Lokalisierung des Proteins in der Zelle soll zusätzlich Hinweise auf die Rolle des Enzyms im Stoffwechsel der Zelle liefern.本课题也将利用链霉菌的异型表达系统研究硒-蛋氨酸-突变体的韦尔登，并在今后几年内不断研究其结构。Die Expression von aktivem，rekombinanten Protein ist häufig in E.大肠杆菌不多。Daher würde ein alternatives Expressionssystem，welches die rekombinante Herstellung von Proteinen und deren Mutanten ermöglicht，von großem Vorteil sein.