細胞内動態制御を可能とするin vivo癌への革新的な核酸送達システムの構築

构建一种创新的体内癌症核酸递送系统，能够控制细胞内动力学

• 批准号: 10J02352
• 负责人: 櫻井 遊
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J02352/
• 关键词: siRNA; リポソーム; がん; DDS; 5' RACE-PCR法; がん治療; ドラッグデリバリーシステム

当該年度では,siRNAの細胞内動態制御技術を用いたがん治療を目的として,in vivoでのsiRNAの作用の確認や,これによる治療効果の評価を行った。昨年度までに生体内環境に応答してsiRNAが細胞内へと移行するカチオン性脂質YSK05を含むMEND(YSK-MEND)の調製しており,今年度は、YSK-MENDに封入するsiRNAを、抑制することで腫瘍細胞に対して殺細胞効果を有する遺伝子であるPLK1に対するsiRNA(si-PLK1)を内封し、担がんマウスに対しての治療効果を評価した。治療用siRNAを内封したMENDを3.0mg/kgで6回静脈内投与を行ったところ、穏やかな腫瘍成長抑制効果が得られたもののその阻害は有意なものではなかった。この成長抑制効果を更に増強するために、PLK1のノックダウンと協調して作用が強まることが知られているドキソルビシンとの同時投与を試みた。ドキソルビシンはリボソームに内封した形で担がんマウスに投与を行い、1.5mg/kgでsiRNA封入MENDと最初の3回まで同時に投与を行った。その結果、ドキソルビシンの同時投与によってより強い抑制効果が観察された。また、アポトーシスが起きた細胞と反応して蛍光を発する試薬を投与することで、腫瘍内のアポトーシスの様子を観察したところ、si-PLK1とドキソルビシンの同時投与によってアポトーシスが強く誘導されていることが明らかとなった.この結果,siRNAにより既存の抗ガン剤の効果を高めるという、併用療法に繋がる結果であると考えている。また、本研究で用いた腎細胞がんは既存の抗ガン剤が奏功しないがん種であることから、この成果は腎細胞がんの新たな治療法の開発に繋がると考えられる。

When the annual で は, siRNA の royal technology を intracellular dynamic system with い た が ん treatments を と し て, the in vivo で の siRNA の の confirm や, こ れ に よ る treatment services fruit の review 価 を line っ た. Born yesterday annual ま で に environment in vivo に 応 answer し て siRNA が intracellular へ と transitional す る カ チ オ ン sex lipid YSK05 を containing む MEND (YSK - MEND) の modulation し て お り, our は, YSK MEND に す sealed る siRNA を, inhibit す る こ と で swollen sores cells に し seaborne て kill cells working fruit を す る 伝 son で あ る PLK1 に す seaborne る siRNA (si - PLK1) を photosensitive し, bear が ん マ ウ ス に し seaborne て の treatment services fruit を review 価 し た. Treatment with siRNA を photosensitive し た MEND を 3.0 mg/kg で 6 back to cast with intravenous line を っ た と こ ろ, one や か な swollen sores growth inhibition of fruit comes unseen が ら れ た も の の そ の resistance against は intentionally な も の で は な か っ た. こ の growth inhibition of unseen fruit を に raised strong す る た め に, PLK1 の ノ ッ ク ダ ウ ン と coordination し て strong role が ま る こ と が know ら れ て い る ド キ ソ ル ビ シ ン と の also cast with を try み た. ド キ ソ ル ビ シ ン は リ ボ ソ ー ム に photosensitive し た form で bear が ん マ ウ ス に cast with を い, 1.5 mg/kg で siRNA MEND sealed と の 3 back to the initial ま で whilst に with を っ た. The results of そ そ, ドキソ ドキソ ビシ ビシ <e:1>, when administered simultaneously with によってよ, showed a strong inhibitory effect on された. ま た, ア ポ ト ー シ ス が up き と た cells against 応 し て 蛍 light を 発 す る try 薬 を cast with す る こ と で, swollen sores の ア ポ ト ー シ ス の others child を 観 examine し た と こ ろ, si - PLK1 と ド キ ソ ル ビ シ ン の cast and に よ っ て ア ポ ト ー シ ス が strong く induced さ れ て い る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の results, siRNA に よ り existing の resistance ガ ン tonic の unseen high を め る と い う, and therapy に 繋 が る results で あ る と exam え て い る. ま た, this study で い た renal cell が ん は existing の resistance ガ ン tonic が play work し な い が ん kind で あ る こ と か ら, こ の results は renal cell が ん の new た な therapy の open 発 に 繋 が る と exam え ら れ る.

项目成果

A pH-sensitive cationic lipid facilitates the delivery of liposomal siRNA and gene silencing activity in vitro and in vivo

• DOI: 10.1016/j.jconrel.2012.09.009
• 发表时间: 2012-11-10
• 期刊: JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE
• 影响因子: 10.8
• 作者: Sato, Yusuke;Hatakeyama, Hiroto;Harashima, Hideyoshi
• 通讯作者: Harashima, Hideyoshi

Endosomal escape and the knockdown efficiency of liposomal-siRNA by the fusogenic peptide shGALA

• DOI: 10.1016/j.biomaterials.2011.04.047
• 发表时间: 2011-08-01
• 期刊: BIOMATERIALS
• 影响因子: 14
• 作者: Sakurai, Yu;Hatakeyama, Hiroto;Harashima, Hideyoshi
• 通讯作者: Harashima, Hideyoshi

Gene Silencing via RNAi and siRNA Quantification in Tumor Tissue Using MEND, a Liposomal siRNA Delivery System

• DOI: 10.1038/mt.2013.57
• 发表时间: 2013-06-01
• 期刊: MOLECULAR THERAPY
• 影响因子: 12.4
• 作者: Sakurai, Yu;Hatakeyama, Hiroto;Harashima, Hideyoshi
• 通讯作者: Harashima, Hideyoshi

pH応答性カチオン性脂質を用いた腫瘍組織へのsiRNAデリバリーシステムの構築

使用 pH 响应性阳离子脂质构建 siRNA 递送系统至肿瘤组织

• 发表时间: 2012
• 作者: 2. Sato Y;Hatakeyama H;Sakurai Y Hyodo M;Akita H;Harashima H;綾野孝則;櫻井遊;綾野孝則;櫻井遊,畠山浩人,佐藤悠介,兵藤守,秋田英万,原島秀吉
• 通讯作者: 櫻井遊,畠山浩人,佐藤悠介,兵藤守,秋田英万,原島秀吉

エンドソーム脱出素子を搭載したsiRNAデリバリーシステムの開発

开发配备内体逃逸元件的 siRNA 递送系统

• 发表时间: 2010
• 作者: 2. Sato Y;Hatakeyama H;Sakurai Y Hyodo M;Akita H;Harashima H;綾野孝則;櫻井遊;綾野孝則;櫻井遊,畠山浩人,佐藤悠介,兵藤守,秋田英万,原島秀吉;綾野孝則;Sakurai Yu;櫻井遊;綾野孝則;櫻井遊
• 通讯作者: 櫻井遊