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膜受容体輸送および細胞分裂におけるカルシウム結合蛋白質ALG－2の生理機能解析

钙结合蛋白ALG-2在膜受体转运和细胞分裂中的生理分析

基本信息

批准号：
10J06598
负责人：
奥村真弓
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J06598/
关键词：
ALG-2 カルシウム結合タンパク質細胞分裂相互作用モチーフ CHMP IST1 ESCRT-III ESCRT-I ALIX カルシウム ESCRT CHMP1

项目摘要

ESCRTタンパク質は、エンドソーム上における内部小胞形成や、細胞分裂、レトロウイルスの宿主細胞からの出芽において、中心的な役割を果たすことが明らかにされているESCRT-III関連因子であるIST1は特に細胞質分裂に関与すると考えられている。ヒトをはじめ脊椎動物のIST1は、CHMP様領域とともに、他のESCRT-IIIタンパク質がもっていないプロリンに富んだ領域(Pro-rich region,PRR)をもつが、PRRにはMetとProが繰り返すMPMPMPMP配列が存在する。ヒト遺伝子多型でMPが5回繰り返すものもあり、またVP配列をもつ生物種(トリ)も存在する。Valは一塩基置換によりMetに変換するため、M/VP繰り返し配列はIST1に何らかの基本的な機能を付与していると考えられる。HEK293T細胞にタグ付加IST1を発現させプルダウン実験を行ったところ、ALG-2がカルシウム依存的にプルダウンされた。またIST1とALG-2の相互作用には、IST1のMet-Pro繰り返し配列が重要であることが判明した。さらにESCRT-III蛋白質CHMP1を共発現させると、IST1とALG-2の相互作用が促進された。以上のことから、IST1はALG-2とカルシウム依存的に相互作用すること、さらにこの相互作用はCHMP1により安定化されることが示唆された。ALG-2をRNA干渉法によって発現レベルを抑制させた細胞は、一部、細胞分裂の異常が観察された。しかし、統計的に有意差があるデータは得られず、細胞種により異なる結果を与えると思われる。

ESCRT-III related factors are related to cytoplasmic division, cell division, cell division, budding, and central cleavage of host cells. In vertebrate IST1, CHMP domain, and other ESCRT-III domains,PRR (Pro-rich region), PRR (Met Pro), MPMPMP alignment exists. The genetic diversity of the species is characterized by the presence of five distinct species, i.e., five distinct species, and five distinct species. Val is a base substitution, M/VP is a base substitution, IST 1 is a base substitution, M/VP is a base substitution, IST1 is a base substitution, IST 1 is a base substitution, and IST 1 is a base substitution. The discovery of IST1 in HEK293T cells is currently underway, and ALG-2 is a highly dependent protein. The interaction between IST1 and ALG-2 is important in determining IST1's Met-Pro alignment. The interaction between ESCRT-III protein CHMP-1 and IST-1 and ALG-2 was promoted. The interaction between IST1 and ALG-2 depends on the stability of CHMP1. ALG-2 RNA stem cell assay inhibits cell development and detection of cell division abnormalities. The results of statistical analysis are different.