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細胞核内のミオシン‐アクチンモーターによるゲノム機能制御機構の解明とその応用

细胞核肌球蛋白-肌动蛋白运动基因组功能调控机制的阐明及其应用

基本信息

批准号：
21658037
负责人：
原田昌彦
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞質のミオシンとアクチンによる分子モーターシステムは、細胞運動や物質の輸送に重要な役割を果たしている。研究代表者らは、アクチンファミリー分子が細胞核内に存在しており、クロマチン・細胞核内の機能構造に重要な役割を果たしていることを見出している。一方で、本研究の海外研究協力者であるカレル大(チェコ)のDr.PavelHozakは、細胞核内のミオシンファミリーを見出し、遺伝子発現にこのミオシンモーターが関与することを報告している。本研究では、核内のミオシン-アクチンファミリーによるゲノム機能制御の分子機構を解明すると共に、その機構を利用した人工的な転写・分化・再生の制御に向けての応用展開を図ることを目的としている。細胞核に局在するアクチン関連タンパク質であるArp6を破壊した細胞をDT40細胞を用いて作成し、核ミオシンのダイナミクスをFRAP(消光後蛍光回復測定)によって解析したところ、そのダイナミクスに変化が観察された。また、Arp6ノックダウンによっても変化が観察された。Arp6と核内ミオシンの相互作用は、培養細胞中でタグを付加したタンパク質を免疫沈降法によって解析することで確認された。さらに、遺伝子の人工的な制御に向け、複数のコンストラクトを作成し、その機能の確認を行った。これらの研究により、細胞核内のアクチンーミオシンファミリーによるゲノム機能制御の存在と、その応用展開における重要な知見が得られた。

Cytoplasm is a key component of cellular mobility and substance transport. The research representatives have shown that molecules exist in the nucleus and that important functional structures exist in the nucleus. Dr. Pavel Hozak, an overseas research collaborator of this study, reported on the discovery of DNA in the nucleus and the development of DNA. The purpose of this study is to understand the molecular mechanism of functional control in the nuclear system, to understand the mechanism of artificial development, to differentiate, to control, and to develop the mechanism of functional control. Cell nucleus is related to the quality of the cell, Arp6 is broken, DT40 cells are used to create, nuclear and light recovery after extinction FRAP(light recovery after extinction) analysis, and detection. Arp6 is the most important part of the game. The interaction between Arp6 and nuclear protein was confirmed by immunoprecipitation assay. In addition, the manual control direction of the transmission, the creation of a plurality of components, and the confirmation of their functions are carried out. This research is aimed at finding out the important knowledge of the existence of functional control and the development of functional control in the nucleus.